3 結果與討論
3.1 4株嗜酸乳桿菌的耐酸力評價(jià)
4株嗜酸乳桿菌菌株ATCC4356、La-IM1、La-IM2和La-IM3在pH2.5 的PBS 緩沖液中作用3h 后的活菌數分別為:2.92 ×108、1.2 ×108、1.13 ×109和 1.18 ×108 CFU/mL,存活率分別為:73.92%、70.91%、102.72%和83.69%;罹鷶稻笥108CFU/mL,存活率均高于60%,證明4 株嗜酸乳桿菌在pH 為2.5 的條件下酸耐受性較好,其中菌株La-IM2 的酸耐受性最高。 另外,菌株La-IM2 的存活率超過(guò)100%,原因可能是該菌株來(lái)自于開(kāi)菲爾粒,而開(kāi)菲爾粒的發(fā)酵酸度很高,該菌株經(jīng)過(guò)長(cháng)期低pH 值的酸適應后,菌株的酸耐受性進(jìn)一步增加,因而變得較另外3株嗜酸乳桿菌菌株更為耐酸;其次,本實(shí)驗采用MRS 液體培養基調節pH 值作為菌株的酸耐受基質(zhì),使得較耐酸的該菌株可以在其中繼續生長(cháng),菌液濃度進(jìn)一步升高,存活率超過(guò) 100%。
3.2嗜酸乳桿菌La-IM2 的生長(cháng)曲線(xiàn)的測定結果
嗜酸乳桿菌La-IM2的生長(cháng)曲線(xiàn)可知,在2h的時(shí)候該菌即可進(jìn)入對數期生長(cháng),在10h后開(kāi)始進(jìn)入穩定期。隨著(zhù)培養時(shí)間的延長(cháng),培養基中的pH值逐漸降低,24h后降低為3.6,這說(shuō)明該菌生長(cháng)速率較快,產(chǎn)酸能力較強,適合于作益生菌菌株。
3.3 嗜酸乳桿菌La-IM2在不同pH 條件下的酸耐受性評價(jià)結果
嗜酸乳桿菌La-IM2在pH 1.5、pH 2.5、pH 3.5、pH 4.5、pH 7.2條件下作用1.5h后的活菌數分別為1.42 ×106、2.96 ×108、5.45 ×108、3.85 ×108、3.95×108CFU/mL;在3h后的活菌數分別為0、2.92 ×108、4.80 ×108、4.15 ×108、3.60 ×108 CFU/mL。該菌在pH 1.5 時(shí)培養3h后幾乎沒(méi)有活菌的存在,而培養 1.5h后的活菌數仍然在 106CFU/mL 以上,且其他作用條件下的活菌數均在108CFU/mL 以上,證明該菌株酸耐受性非常好。
通過(guò)模擬胃酸pH 值條件下的酸耐受性實(shí)驗,證明嗜酸乳桿菌可以以較高的活菌數順利過(guò)胃,進(jìn)而起到益生菌的作用(國際乳品聯(lián)合會(huì )IDF推薦益生菌濃度> 107CFU/g 時(shí)能順利到達小腸并發(fā)揮益生作用)。但是,由于時(shí)間原因,本實(shí)驗只對嗜酸乳桿菌La-IM2 在模擬胃酸pH 條件下的耐受性進(jìn)行了評價(jià),沒(méi)有對其在模擬胃液環(huán)境下的存活率進(jìn)行測定,因而不能完全說(shuō)明該菌可以以較高的活菌數過(guò)胃。還需要進(jìn)一步實(shí)驗,以測定其在模擬胃液環(huán)境下的活菌數,最終證實(shí)其是否具有益生功效。
4 結 論
(1)4株嗜酸乳桿菌ATCC4356、La-IM1、La-IM2和La-IM3 在pH2.5 ,3h 條件下的酸耐受性較高,活菌數均大于108CFU/mL,存活率均高于60%。其中菌株La-IM2 的酸耐受性最高,活菌數達到 1.13 ×109 CFU/mL。
(2)嗜酸乳桿菌La-IM2滿(mǎn)足典型的對數生長(cháng)曲線(xiàn)規律,在2h 時(shí)該菌進(jìn)入對數期生長(cháng),10h后進(jìn)入穩定期。說(shuō)明該菌生長(cháng)速率很快,產(chǎn)酸能力較強,適合于用作益生菌菌株。
(3)嗜酸乳桿菌La-IM2雖然在pH1.5 時(shí)作用3 小時(shí)后活菌數為0,但是在其他作用條件下的活菌數均在 108CFU/mL以上,證明該菌株在模擬胃酸pH 條件下的耐受性較好,可以通過(guò)胃液的低酸性環(huán)境進(jìn)而發(fā)揮益生功效。
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