1、范圍
本標準規定了食品中常見(jiàn)的常見(jiàn)產(chǎn)毒霉菌的鑒定方法。
本標準適用于曲霉屬、青霉屬、鐮刀菌屬及其他菌屬的產(chǎn)毒霉菌鑒定。
2、規范性引用文件
下列文件中的條款通過(guò)本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單〔不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標準。GB/T4789.28一20此食品衛生微生物學(xué)檢驗染色法、培養基和試劑
3、設備和材料
3.1冰箱:O℃~4℃。
3.2恒溫培養箱:25℃—28℃
3.3顯微鏡:IOX—100X。
3.4目鏡測微計。
3.5物鏡測微計,
3.6無(wú)菌接種罩。
3.7放大鏡。
3.8滴瓶
3.9接種勾針。
3.10分離針。
3.11載玻片。
3.12蓋玻片:18mm*18mm。
3.13滅菌刀子。
4、培養基和試劑
4.1乳酸—苯酚液:按GB/T4789.28一2003中3.24規定。
4.2察氏培養基:按GB/T4789.28一2003中4.77規定。
4.3馬鈴薯—葡萄糖瓊脂培養基:按GB/T4789.28一2003中4.78規定。
4.4馬鈴薯瓊脂培養基:按GB/T4789.28一2003中4.79規定。
4.5玉米粉瓊脂培養基:按GB/T4789.28一2003中4.81規定。
5、操作步驟
5.1菌落的觀(guān)察:為了培養完整的巨大菌落以供觀(guān)察記錄,可將純培養物點(diǎn)植于平板上。方法是:將平板倒轉,向上接種一點(diǎn)或三點(diǎn).每菌接種兩個(gè)平板,倒置于25℃~28℃溫箱中進(jìn)行培養。當剛長(cháng)出小菌落時(shí),取出一個(gè)平皿,以無(wú)菌操作,用小刀將菌落連同培養基切下1cm*2cm的小塊,置菌落一側,繼續培養,于5d—14d進(jìn)行觀(guān)察。此法代替小培養法,可直接觀(guān)察子實(shí)體著(zhù)生狀態(tài)。
5.2斜面觀(guān)察:將霉菌純培養物劃線(xiàn)接種(曲霉、青霉)或點(diǎn)種〔鏈刀菌或其他菌)于斜面,培養5d—14d,觀(guān)察菌落形態(tài),同時(shí)還可以將菌種管置顯微鏡下用低倍鏡直接觀(guān)察孢子的形態(tài)和排列。
5.3制片:取載玻片加乳酸一苯酚液一滴,用接種針鉤取一小塊霉菌培養物,置乳酸一苯酚液中,用兩支分離針將培養物撕開(kāi)成小塊,切忌涂抹,以免破壞霉菌結構;然后加蓋玻片,如有氣泡.可在酒精燈上加熱排除。制片時(shí)最好是在接種罩內操作,以防孢子飛揚。5.4鏡檢:觀(guān)察霉菌的菌絲和孢子的形態(tài)和特征、孢子的排列等,并做詳細記錄。5.5報告:根據菌落形態(tài)及鏡檢結果,參照以下各種霉菌的形態(tài)描述及檢索表,確定菌種名稱(chēng).
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