食品衛生微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數2—GB

6操作步驟
6.1以無(wú)菌操作稱(chēng)取檢樣25g（mL)，放入含225mL滅菌水的具玻塞錐形瓶中，振搖30min，即為1：10稀釋液。
6.2用滅菌吸管吸取1：10稀釋液10mL，注人滅菌試管中，另用1ml滅菌吸管反復吹吸鄒次，使霉菌抱子充分散開(kāi)。
6.3取1ml 1：10稀釋液注入含有9ml滅菌水的試管中，另?yè)Q一支1ml滅菌吸管吹吸五次，此液為1：100稀釋液。
6.4按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1ml滅菌吸管，根據對樣品污染情況的估計，選擇三個(gè)合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時(shí)，吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中。每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿，然后將晾至45℃左右的培養鑒注人平皿中，并轉動(dòng)平皿使之與樣液混勻，待瓊脂凝固后，倒置于25℃～28℃溫箱中，3d后開(kāi)始觀(guān)察，共培養觀(guān)察5d。
6.5計算方法：通常選擇菌落數在10～150之間的平皿進(jìn)行計數，同稀釋度的兩個(gè)平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數，即為每克（或毫升）檢樣中所含霉菌和酵母數。稀釋度選擇及菌落報告方式可參考GB/T4789.2.6.6報告：每克（或毫升）食品所含霉菌和酵母數以cfu/g(mL）表示。
7、霉菌直接鏡檢計數法霉菌直接鏡檢計數法見(jiàn)附錄A
附錄A（資料性附錄）霉菌直接鏡檢計數法
常用的為郝氏霉菌計測法，本方法適用于番茄醬罐頭。
A.1設備和材料
A.1.1折光儀。
A.1.2顯微鏡。
A.1.3郝氏計測玻片：具有標準計測室的特制玻片。
A.1.4蓋玻片。
A.1.5測微器：具標準刻度的玻片。
A.2操作步驟
A.2.1檢樣的制備：取定量檢樣，加蒸餾水稀釋至折光指數為1.3447—1.3460（即濃度為7.9%—8,8%)，備用。
A.2.2顯微鏡標準視野的校正：將顯微鏡按放大率90倍一125倍調節標準視野，使其直徑為1.382mm.
A.2.3涂片：洗凈郝氏計測玻片，將制好的你準液，用玻璃棒均勻的攤布于計測室，以備觀(guān)察。
A.2.4觀(guān)測：將制好之載玻片放于顯微鏡標準視野下進(jìn)行霉菌觀(guān)測，一般每一檢樣觀(guān)察孫個(gè)視野，同一檢樣應由兩人進(jìn)行觀(guān)察。
A.2.5結果與計算：在標準視野下，發(fā)現有霉菌菌絲其長(cháng)度超過(guò)標準視野（1.382mm）的六分之一或三根菌絲總長(cháng)度超過(guò)標準視野的六分之一（即測微器的一格）時(shí)即為陽(yáng)�。�+)，否則為陰性（一），按100個(gè)視野計，其中發(fā)現有霉菌菌絲體存在的視野數，即為霉菌的視野百分數。   
   

 

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