食品衛生微生物學(xué)檢驗大腸菌群測定2——GB

7.1檢樣稀釋
7.1.1以無(wú)菌操作將檢樣259 (mL）放于含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶?jì)龋ㄆ績(jì)阮A置適當數量的玻璃珠）或滅菌乳缽內，經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質(zhì)器，以8 000r／min～10000r/min的速度處理1min，做成l：10的均勻稀釋液。
7.1.2用1mL滅菌吸管吸取1：10稀釋液1mL，注人含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內，振搖試管混勻，做成1：100的稀釋液。
7.1.3另取1mL滅菌吸管，按上條操作依次做l0倍遞增稀釋液，每遞增稀釋一次，換用1支1mL滅菌吸管．
7.1.4根據食品衛生標準要求或對檢樣污染情況的估計，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度，接種三管。
7.2乳糖發(fā)酵試驗將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內，接種量在1mL以上者，用雙料乳糖膽鹽發(fā)醉管，1mL及1mL以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一稀釋度接種三管，置36℃ 士1℃ 溫箱內，培養24h士2h，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者，則按下列程序進(jìn)行。
7.3分離培養將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃ 土1℃ 溫箱內，培養18h～24h，然后取出，觀(guān)察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實(shí)試驗。
7.4證實(shí)試驗在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1個(gè)一2個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置36℃ 士1℃ 培養箱內培養24h士2h，觀(guān)察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無(wú)芽胞桿菌，即可報告為大腸菌群陽(yáng)性。
7.5報告根據證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的管數，煮MPN檢索表．報告每100mL (g）大腸菌群的MPN值。
8糞大腸菌群（Faecal coli介朋）
8.1用接種環(huán)將所有產(chǎn)氣的乳糖膽鹽發(fā)酵管培養物（見(jiàn)7.2）轉種于EC肉湯管內，置“44.5℃ 士0.2℃ 水浴箱內（水浴箱內的水面應高于EC肉湯液面），培養24h士2h，經(jīng)培養后，如所有EC肉湯管均不產(chǎn)氣，則可報告為陰性；如有產(chǎn)氣者，則將所有產(chǎn)氣的EC肉湯管分別轉種于伊紅美藍瓊脂平板上，置培養18h-24h，凡平板上有典型菌落者，則證實(shí)為糞大腸菌群陽(yáng)性。
8.2結果報告根據證實(shí)為糞大腸菌群的陽(yáng)性管數，查MPN檢索表，報告每100mL(g）糞大腸菌群的MPN值。   
   

 

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