一、基本原理
糖發(fā)酵試驗是最常用的生化反應,在腸道細菌的鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類(lèi)作為碳源和能源,但是它們在分解糖的能力上有很大的差異,有些細菌能分解某種糖并產(chǎn)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);有些細菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣;傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不能分解乳糖;普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能分解乳糖。
酸的產(chǎn)生可利用指示劑來(lái)斷定。在配制培養基時(shí)預先加入溴甲酚紫[pH5.2(黃色)-6.8(紫色)],當發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),可使培養基由紫色變?yōu)辄S色。氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無(wú)氣泡來(lái)證明,如圖Ⅹ-4。
二、器材
大腸桿菌,普通變形桿菌( Proteus vulgaris)斜面各1支;盛有葡萄糖發(fā)酵培養基的試管和乳糖發(fā)酵培養基的試管各3支(內裝有倒置的德漢氏小管),試管架,接種環(huán)等。
三、操作步驟
1、編號
用記號筆在各試管上分別標明發(fā)酵培養基名稱(chēng)和所接種的菌名。
2、接種
取盛有葡萄糖發(fā)酵培養基的試管3支,按編號1支接種大腸桿菌,另1支接種普通變形桿菌,第3支不接種,作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養基試管3支,同樣1支接種大腸桿菌,1支接種普通變形桿菌,第3支不接種,作為對照。
3.將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對照管置37℃溫室中培養24小時(shí)。
4.觀(guān)察結果。
四、實(shí)驗報告
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