一、基本原理
細菌對大分子的淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪不能直接利用，必須靠產(chǎn)生的胞外酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶將大分子物質(zhì)分解。胞外酶能分泌擴散到細胞外，將物質(zhì)分解成小單位如糖、氨基酸、甘油與脂肪酸。這些小單位的物質(zhì)能被細菌吸收和利用。水解過(guò)程可通過(guò)底物的變化來(lái)證明，如細菌水解淀粉的區域，用碘測定不再產(chǎn)生藍色；水解明膠可觀(guān)察到明膠被液化；脂肪水解后產(chǎn)生脂肪酸改變培養基的pH，其中的中性紅指示劑使培養基從淡紅色變?yōu)樯罴t色。
二、器材
金黃色葡萄球菌，枯草芽孢桿菌，大腸桿菌，綠膿桿菌（Bacte-rium Pyocyaneum）斜面各一支；
油脂培養基，淀粉培養基，明膠培養基，無(wú)菌平皿，接種環(huán)和接種針，革蘭氏染色用盧戈氏碘液（Lugols iodine solution）等。
1．油脂水解試驗
(1)將溶化的油脂培養基冷至45℃左右時(shí)，充分振蕩，使油脂均勻分布，用無(wú)菌操作倒入平皿中，待凝。
(2)將制成的平板用記號筆劃成兩半，一半接種金黃色葡萄球菌作為對照，另一半接種枯草芽孢桿菌作為試驗菌，均用無(wú)菌操作畫(huà)“+”接種，如圖Ⅹ-1。
(3)將接種的平板倒置于37℃溫室中培養24小時(shí)。
(4)取出平板，觀(guān)察平板底層長(cháng)菌的地方，如出現紅色斑點(diǎn)，說(shuō)明脂肪被水解，為陽(yáng)性反應。
2．淀粉水解試驗
(1)將淀粉培養基溶化后，冷至45℃左右，以無(wú)菌操作制成平板。
(2)用記號筆將平板劃成兩半，一半接種大腸桿菌作為試驗菌，另一半接種枯草芽孢桿菌作為對照菌，均用無(wú)菌操作劃線(xiàn)接種，如圖Ⅹ-2。
(3)將上述已接種的平板倒置于37℃溫室中培養24小時(shí)。
(4)將已培養24小時(shí)的平皿取出，打開(kāi)皿蓋，滴加少量盧戈氏碘液于平板上，輕輕旋轉平皿，使碘液均勻鋪滿(mǎn)整個(gè)平板。如菌苔周?chē)霈F無(wú)色透明圈，說(shuō)明淀粉已被水解。透明圈的大小、說(shuō)明該菌水解淀粉能力的強弱。
3．明膠液化試驗
(1)取三管明膠培養基，用記號筆標明各管接種的菌名。分別以無(wú)菌操作用接種針穿刺接種大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、綠膿桿菌。
(2)接種后，置20℃溫室中培養2—5天。
(3)觀(guān)察明膠培養基液化情況（圖Ⅹ-3）。
四、實(shí)驗報告
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