一、基本原理
鞭毛是細菌的運動(dòng)“器官”，一般細菌的鞭毛都非常纖細，其直徑為0．01—0．02μm，在普通光學(xué)顯微鏡的分辨力限度以外，故需要用特殊的鞭毛染色法，才能看到。鞭毛染色是借媒染劑和染色劑的沉淀作用，使染料堆積在鞭毛上，以加粗鞭毛的直徑，同時(shí)使鞭毛著(zhù)色，在普通光學(xué)顯微鏡下能夠看到。
在顯微鏡下觀(guān)察細菌的運動(dòng)性，也可以初步判斷細菌是否有鞭毛。通常使用壓滴法或懸滴法觀(guān)察細菌的運動(dòng)性。觀(guān)察時(shí)，要適當減弱光線(xiàn)，增加反差，如果光線(xiàn)很強，細菌和周?chē)囊后w就難以辨別。
二、器材
蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis），假單胞菌（Pseudomonas sp．），金黃色葡萄球菌；
鞭毛染色液，萬(wàn)分之一的美藍水溶液，凡士林，無(wú)菌水，載玻片，凹玻片，蓋玻片等。
三、操作步驟
1．鞭毛染色
(1)菌種用新培養的菌種為宜，如所用菌種已長(cháng)期未移種，則用新制備的斜面連續移種2—3次后再使用。最好是將經(jīng)活化的菌種接種到新制備的瓊脂斜面或半固體培養基平皿上，培(2)制片 在載玻片的一端滴一滴蒸餾水，用接種環(huán)挑取少許備用的菌苔，最好從菌落的邊緣取菌苔，注意不要挑上培養基，在載玻片的水滴中輕沾幾下。將載玻片稍?xún)A斜，使菌液隨水滴緩慢流到另一端，然后平放在空氣中干燥。
(3)染色 涂片干燥后滴加A液染3—5分鐘，用蒸餾水沖洗，或將殘水瀝干或用B液沖去殘水（注意：一定要充分洗凈A液后再加B液，否則背景很臟）。洗凈A液滴加B液后，將玻片在酒精燈上稍加熱，使其微冒蒸汽且不干，一般染30—60秒鐘。然后用蒸餾水沖洗，自然干燥。
(4)鏡檢 鏡檢時(shí)，如未見(jiàn)鞭毛，應在整個(gè)涂片上多找幾個(gè)視野，有時(shí)只在部分涂片上染出鞭毛。菌體為深褐色，鞭毛為褐色。
細菌鞭毛染色要求非常小心細致，染色成功的關(guān)鍵主要決定于：(a)菌種活化的情況，即要連續移種幾次；(b)菌齡要合適，一般在幼齡時(shí)鞭毛情況最好，易于染色；(c)新鮮的染色液；(d)載玻片要求干凈無(wú)油污。鞭毛染色所用載玻片的清洗方法如下：
選擇光滑無(wú)傷痕的玻片。先用洗衣粉煮沸，洗衣粉最好在洗玻片前加蒸餾水煮沸，用濾紙過(guò)濾去渣。為了避免玻片彼此磨損，最好把載玻片放在特制的架上煮，煮畢稍冷卻后取出，用清水洗凈，再放入濃洗液中浸泡24小時(shí)左右，取出用清水沖洗殘酸，最后用蒸餾水洗凈，瀝干水并放于95％乙醇中脫水，取出玻片，用火焰燒去酒精，立即使用。如不立刻使用，可存放于干凈的盒中或50％乙醇中短期存放。由于空氣中常常漂浮油污，最好立即使用。在洗凈的玻片上滴上水滴后應能均勻散開(kāi)。
2．運動(dòng)性觀(guān)察
(1)壓滴法
(a)分別將5ml無(wú)菌水倒入蘇云金芽孢桿菌、假單胞菌和金黃色葡萄球菌的斜面培養物內，制成菌懸液。各取出1ml菌液稀釋至肉眼看不到混濁為止。
(b)各取2—3環(huán)三種稀釋菌液，分別放在三片清潔的載玻片中央，再各放一環(huán)萬(wàn)分之一的美藍水溶液混勻。
(c)用鑷子夾一潔凈的蓋玻片，使其一邊先接觸菌液，然后將整個(gè)蓋玻片慢慢放下，注意不要產(chǎn)生氣泡。按此法分別將蓋玻片覆蓋于三種菌液上。
(d)先以低倍鏡找到標本，再用高倍鏡觀(guān)察，觀(guān)察時(shí)光線(xiàn)要調得暗些。
(2)懸滴法
(a)在潔凈蓋玻片周?chē)可僭S凡士林。
(b)在蓋玻片中央滴一小滴菌液，或用接種環(huán)取1—2環(huán)菌液置于中央。
(c)將凹玻片反轉，使凹窩中心對準蓋玻片上的菌液滴，液滴不得與凹玻片接觸，以接種環(huán)柄輕壓使蓋玻片與凹玻片粘在一起，液滴處于封閉的小室中，防止液滴干燥和氣流的影響。
(d)小心將凹玻片翻轉過(guò)來(lái)，使菌滴仍懸浮在蓋玻片下和凹窩中心（圖Ⅳ-3）。
(e)先用低倍鏡找到懸滴邊緣，再用高倍鏡觀(guān)察。觀(guān)察時(shí)光線(xiàn)要調得暗一些。
用懸滴法分別觀(guān)察蘇云金芽孢桿菌、假單胞菌和金黃色葡萄球菌的運動(dòng)性。細菌的運動(dòng)有一定的前進(jìn)方向，并可轉彎，極生單鞭毛菌類(lèi)多為直線(xiàn)運動(dòng)，周生鞭毛菌類(lèi)多作波浪式運動(dòng)。
四、實(shí)驗報告
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