四、操作步驟
1.觀(guān)察前的準備
。1)置顯微鏡于平穩的實(shí)驗臺上,鏡座距實(shí)驗臺邊沿約3—4cm。鏡檢者姿勢要端正,一般用左眼觀(guān)察,右眼便于繪圖或記錄,兩眼必須同時(shí)睜開(kāi),以減少疲勞,亦可練習左右眼均能觀(guān)察。
。2)調節光源,對光時(shí)應避免直射光源,因直射光源影響物像的清晰,損壞光源裝置和鏡頭,并刺激眼睛。如陰暗天氣,可用日光燈或顯微鏡燈照明。
調節光源時(shí),先將光圈完全開(kāi)放,升高聚光鏡至與載物臺同樣高,否則使用油鏡時(shí)光線(xiàn)較暗。然后轉下低倍鏡觀(guān)察光源強弱,調節反光鏡,光線(xiàn)較強的天然光源宜用平面鏡;光線(xiàn)較弱的天然光源或人工光源宜用凹面鏡。在對光時(shí),要使全視野內為均勻的明亮度。凡檢查染色標本時(shí),光線(xiàn)應強;檢查未染色標本時(shí),光線(xiàn)不宜太強?赏ㄟ^(guò)擴大或縮小光圈、升降聚光器、旋轉反光鏡調節光線(xiàn)。
2.低倍鏡觀(guān)察
檢查的標本需先用低倍鏡觀(guān)察,因為低倍鏡視野較大,易發(fā)現目標和確定檢查的位置。
將金黃色葡萄球菌染色標本置鏡臺上,用標本夾夾住,移動(dòng)推動(dòng)器,使觀(guān)察對象處在物鏡正下方,轉動(dòng)粗調節器,使物鏡降至距標本約 0.5cm處,由目鏡觀(guān)察,此時(shí)可適當地縮小光圈,否則視野中只見(jiàn)光亮一片,難見(jiàn)到目的物,同時(shí)用粗調節器慢慢升起鏡筒,直至物像出現后再用細調節器調節到物像清楚時(shí)為止,然后移動(dòng)標本,認真觀(guān)察標本各部位,找到合適的目的物,并將其移至視野中心,準備用高倍鏡觀(guān)察。
3.高倍鏡觀(guān)察
將高倍鏡轉至正下方,在轉換物鏡時(shí),需用眼睛在側面觀(guān)察,避免鏡頭與玻片相撞。然后由目鏡觀(guān)察,并仔細調節光圈,使光線(xiàn)的明亮度適宜,同時(shí)用粗調節器慢慢升起鏡筒至物像出現后,再用細調節器調節至物像清晰為止,找到最適宜觀(guān)察的部位后,將此部位移至視野中心,準備用油鏡觀(guān)察。
4.油鏡觀(guān)察
(1)用粗調節器將鏡筒提起約2cm,將油鏡轉至正下方。
(2)在玻片標本的鏡檢部位滴上一滴香柏油。
(3)從側面注視,用粗調節器將鏡筒小心地降下,使油鏡浸在香柏油中,其鏡頭幾乎與標本相接,應特別注意不能壓在標本上,更不可用力過(guò)猛,否則不僅壓碎玻片,也會(huì )損壞鏡頭。
(4)從接目鏡內觀(guān)察,進(jìn)一步調節光線(xiàn),使光線(xiàn)明亮,再用粗調節器將鏡筒徐徐上升,直至視野出現物像為止,然后用細調節器校正焦距。如油鏡已離開(kāi)油面而仍未見(jiàn)物像,必須再從側面觀(guān)察,將油鏡降下,重復操作至物像看清為止。
(5)用同樣的方法觀(guān)察枯草芽孢桿菌染色標本。
(6)觀(guān)察完畢,上旋鏡筒。先用擦鏡紙拭去鏡頭上的油,然后用擦鏡紙蘸少許二甲苯(香柏油溶于二甲苯)擦去鏡頭上殘留油跡,最后再用干凈擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。切忌用手或其他紙擦鏡頭,以免損壞鏡頭。用綢布擦凈顯微鏡的金屬部件。(7)將各部分還原,反光鏡垂直于鏡座,將接物鏡轉成八字形,再向下旋。同時(shí)把聚光鏡降下,以免接物鏡與聚光鏡發(fā)生碰撞危險。
五、實(shí)驗報告
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