進(jìn)出口行業(yè)標準-出口食品沙門(mén)氏菌屬(包括亞利桑那菌)——7

6.14 氰化鉀培養基(KCN)
6.14.1制備 　　
蛋白胨　　　　　　　10.0g 　　
氯化鈉　　　　      5.0g 　　
磷酸二氫鉀　　　 　 0.225g 
磷酸氫二鈉　　　　　5.64g　　
硝酸鉀(無(wú)亞硝酸鹽)　1.0g 　　
5g/L氰化鉀溶液　　  10.0mL 　　
蒸餾水              1000.0mL 　　
將蛋白胨、氯化鈉和硝酸鉀加入 900mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10 min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.6±0.1,高壓滅菌121℃,15min,取出置于4℃冰箱內進(jìn)行冷卻�！　�
將磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉溶于100 mL蒸餾水,高壓滅菌121℃,15min,取出進(jìn)行冷卻�！　�
在冷卻后的上述培養液900mL中,以無(wú)菌操作加入磷酸鹽緩沖液100mL和5g/L氰化鉀溶液(必須用冷卻的滅菌蒸餾水配制)10mL,搖混均勻(氰化鉀的最終濃度為0.05 g/L)。并立即分裝滅菌試管(12 mm×100mm),每管約1～1.5mL,同時(shí)加入約0.3mL滅菌石蠟油封蓋。在4℃冰箱中可保存7d�！　　　� 
6.14.2　試驗與判斷 
6.14.2.1制試劑　　
甲液：　　
氨基苯磺酸　 0.8g 　　
5 mol/L乙酸 100.0mL 　　
乙液：　　
α-萘胺　     0.5g 　　
5 mol/L乙酸 100.0mL 
6.14.2.2試驗 　　
在三糖鐵瓊脂斜面上挑取少量菌苔,先接種于吲哚培養基中,混勻(使其濃度近似于 37℃,24h肉湯培養物)然后燒灼接種環(huán),再沾取吲哚培養基少許接種于氰化鉀培養基中, 于37℃培養24±2h。培養之后,先觀(guān)察培養液有無(wú)混濁,然后在每支氰化鉀培養物試管內滴加甲液1滴,然后再滴加乙液1滴,搖勻。 
6.14.2.3判斷　　
強陽(yáng)性反應為鮮紅色,弱陽(yáng)性為粉紅色,在30～60 min內,強陽(yáng)性可轉為暗褐色。陰性無(wú)變化(加試劑前,培養液出現混濁,即有細菌生長(cháng),亦為陽(yáng)性反應)。
6.15 丙二酸鈉培養基(M) 　　
酵母膏　　　 1.0g 　　
硫酸銨　　　 2.0g 　　
磷酸氫二鉀　 0.6g 　　
磷酸二氫鉀　 0.4g 　　
氯化鈉　　   2.0g 　　
丙二酸鈉　　 3.0g 　　
葡萄糖　　　 0.25g 　　
溴麝香草酚藍 0.025g或5g/L溶液5 mL 　　
蒸餾水       1000.0mL 　　
除溴麝香草酚藍外,將其他成分加入蒸餾水中攪拌均勻,靜置約10 min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH6.9±0.1,加入溴麝香草酚藍,再混勻,分裝試管(12mm×100mm), 每管1～1.5mL,高壓滅菌115℃,10min�！　�
試驗與判斷：
接種大量幼嫩待試菌,于37℃培養24±2h,陽(yáng)性反應為普藍色；陰性不變色。 
6.16 衛矛醇半固體瓊脂(D) 　　
蛋白胨　　　　2.0g 
酵母膏        1.0g 　　
衛矛醇　 　　 10.0g 　　
氯化鈉　　　　5.0g 　　
磷酸氫二鉀　　0.3g 　　
溴麝香草酚籃　0.08g或8g/L溶液10mL 　　
瓊　脂        2.5g 　　
蒸餾水　　　  1000.0mL 　　
除溴麝香草酚藍外,將其他成分加入蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10 min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.1±0.1,加入溴麝香草酚籃,呈綠色,分裝試管(12mm×100mm),  in,滅菌后立即取出,冷卻備用�！　�
試驗與判斷：
穿刺接種待試菌,于37℃培養24±2h,陽(yáng)性反應為黃色陰性不變色�！　�
注：新制備的培養基均應用已知陽(yáng)性及陰性菌進(jìn)行測試,以保證培養基質(zhì)量。每管約1～1.5mL,高壓滅菌121℃,15m 
   
   

 

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