進(jìn)出口行業(yè)標準-出口食品沙門(mén)氏菌屬(包括亞利桑那菌)——6

6.12 V-P半固體瓊脂(VP)
6.12.1　制備
蛋白胨 12.0g
酵母膏　 1.0g
葡萄糖 10.0g
氯化鈉　 5.0g
瓊　脂 3.0g
蒸餾水 100.0mL
將各成分加入蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.3 ±0.1,分裝試管(12mm×100mm),每管1～1.5mL,高壓滅菌121℃,10min,滅菌后立即取出冷卻備用。
6.12.2　試驗判斷 
6.12.2.1　配制試劑
甲液：　　
α-萘酚　　　 6.0g
無(wú)水乙醇溶液 100.0mL
乙液：　　
氫氧化鉀       40.0g
肌　酸　　　　 0.3g
蒸餾水         100.0mL
先將氫氧化鉀溶于水中,再加入肌酸。
甲液和乙液保存于4℃冰箱中,可使用2個(gè)月,
6.12.2.2　試驗
接種幼嫩待試菌,于37℃培養24±2h,將甲液0.2mL(約6滴)加入試管中,搖混均勻, 再加乙液0.1mL(約3滴),再搖混均勻。
6.12.2.3　判斷
陽(yáng)性反應立即或在15min內呈現紅色,陰性為銅色。陰性結果在1 h后再做一次檢查。有些試管在數小時(shí)后紅色會(huì )逐漸消失,此仍作陽(yáng)性反應。
6.13吲哚培養基(Ⅰ):
6.13.1　制備
蛋白胨 10.0g
氯化鈉　　　 5.0g
DL-色氨酸　 1.0g
蒸餾水　　　1000.0mL
除DL-色氨酸外,將其他成分加入蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10 min。另將DL-色氨酸加入約4mL 1mol/L氫氧化鈉溶液中,待溶解后,再將兩液進(jìn)行混合并加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.4±0.1,分裝試管(12mm×100mm),每管1～1.5mL,高壓滅菌121℃,15min。
6.13.2　試驗與判斷
6.13.2.1　配制試劑
柯凡克試劑：　
對二甲氨基苯甲醛 10.0g
戊　醇 150.0mL 　　
濃鹽酸 50.0mL
將色澤鮮明干燥的對二甲氨基苯甲醛溶于戊醇中,緩慢攪拌加入鹽酸,加熱至60℃, 呈深黃色,靜置6～7h,變成黃色即可使用。試液宜小量配制,不用時(shí)保存于4℃冰箱內。久存后試液變成黃褐色不可使用。
6.13.2.2試驗接種待試菌,于37℃培養24±2h,滴加柯凡克試劑0.1mL。 
6.13.2.3判斷　　
陽(yáng)性反應出現紅色環(huán)；陰性為黃棕色環(huán)。    
   

 

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