進(jìn)出口行業(yè)標準-出口食品沙門(mén)氏菌屬(包括亞利桑那菌)——4

6.5.4　煌綠水溶液
煌　綠　 0.5g
蒸餾水   100.0mL
溶解后,存放暗處,不少于1d,使其自然滅菌。
6.5.5　牛膽鹽溶液
牛膽鹽 10.0g
蒸餾水 100.0mL 
加熱煮沸至完全溶解,高壓滅菌121℃,20 min。
6.5.6　制備
基礎液            900.0mL
硫代硫酸鈉溶液    100.0mL
碘溶液　　　　　　20.0mL
煌綠水溶液　　　  2.0mL
牛膽鹽溶液        50.0mL
臨用前,按上列順序,以無(wú)菌操作依次加入基礎液中,每加入一種成分,均應搖勻后再加入另一種成分。最后分裝于滅菌玻璃瓶?jì)?每瓶100mL或225mL。
6.6　亞硫酸鉍瓊脂(BS)
蛋白胨　　　 10.0g
牛肉膏　　　 5.0g
葡萄糖　　　 5.0g
硫酸亞鐵　　 0.3g
磷酸氫二鈉 　4.0g
煌　綠　　　 0.025g或5g/L水溶液5mL
檸檬酸鉍銨   2.0g
亞硫酸鈉　　 6.0g
瓊　脂       18.0g 
蒸餾水　　　1000.0mL
將前三種成分加入300 mL蒸餾水中(制作基礎液),硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉分別加入 20mL和30mL蒸餾水中,檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉分別加入另一20mL和30mL蒸餾水中,瓊脂加入600mL蒸餾水中。然后分別攪拌均勻,靜置約10min,加熱煮沸至完全溶解。冷至80℃ 左右時(shí),先將硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉混勻,倒入基礎液中,混勻。將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉混勻,倒入基礎液中,再混勻。調至pH7.5±0.1,隨即傾入瓊脂液中,混合均勻,冷至 50～55℃。加入煌綠溶液,充分混勻后立即傾注平皿,每皿約20mL。
本培養基不需要高壓滅菌,在制備過(guò)程中不宜過(guò)分加熱,避免降低其選擇性,新配制的培養基呈玉白色不透明,貯于室溫暗處,超過(guò)48h會(huì )降低其選擇性,本培養基宜于當天制備,第二天使用。
6.7　膽硫乳瓊脂(膽鹽　硫化氫　乳糖瓊脂 DHL)
蛋白胨      20.0g
牛肉膏　　　3.0g 
乳　糖      10.0g
蔗　糖      10.0g
牛膽鹽　　　2.0g
硫代硫酸鈉　2.2g
檸檬酸鈉　　1.0g
檸檬酸鐵銨　1.0g 
中性紅　　　0.03g或5g/L水溶液6mL
瓊　脂      16.0g
蒸餾水　　　1000.0mL
除中性紅和瓊脂外,將其他成分加入400 mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10 min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.3±0.1。另將瓊脂加入600mL蒸溜水中,攪拌均勻,靜置約 10min,加熱煮沸至完全溶解。將兩種溶液混合后,再加入5g/L中性紅水溶液6mL,攪拌均勻,冷至50～55℃,傾注平皿,每皿約20mL。
本培養基不需高壓滅菌,也不再進(jìn)行任何加熱。制成的平板為橙黃色。    
   

 

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