進(jìn)出口行業(yè)標準-出口食品沙門(mén)氏菌屬(包括亞利桑那菌)——1

1、主題內容與適用范圍
本標準規定了凍豬肉、凍雞肉、雞蛋黃粉和冰雞蛋白中沙門(mén)氏菌屬(包括亞利桑那菌)的檢驗方法。
本標準適用于凍豬肉、凍雞肉、雞蛋黃粉和冰雞蛋白中沙門(mén)氏菌屬(包括亞利桑那菌)檢驗。其他食品可參照使用。
2　樣品制備及增菌培養
2.1　肉類(lèi)
2.1.1　如為冷凍產(chǎn)品,應在45℃以下不超過(guò)15 min,或在2～5℃不超過(guò)18h解凍。若不能及時(shí)檢驗,應置于—15℃左右保存。非冷凍而易腐的食品,置于4℃冰箱保存。
2.1.2　以無(wú)菌操作,稱(chēng)取剪碎后的瘦肉樣品25 g,置于滅菌均質(zhì)杯內,加入25 mL,緩沖胨水增菌液,以8000～10000r/min均質(zhì)1 min,移入盛有200mL緩沖胨水增菌液的500mL廣口瓶?jì)?混合均勻,如pH低于6.6,用滅菌1mol/L氫氧化鈉溶液,調pH至6.8±0.2,于37℃水浴培養4h (以增菌液達到37℃時(shí)算起),進(jìn)行前增菌；其后,移取10mL轉種于盛有100mL四硫磺酸鹽煌綠增菌液的250mL玻璃瓶?jì)?搖勻,于42±1℃培養20± 2h,進(jìn)行選擇性增菌。必要時(shí),同時(shí)另稱(chēng)取25g剪碎的瘦肉樣品,加入25mL亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,同樣進(jìn)行均質(zhì)。其后,移入盛有200mL亞硒酸鹽胱氨酸增菌液的500mL廣口瓶?jì)?混合均勻,如pH低于6.6, 用滅菌1mol/L氫氧化鈉溶液調pH至6.8±0.2,于37℃培養24±2 h,進(jìn)行直接選擇性增菌。
2.2　蛋品 
2.2.1　冰蛋品(冰雞全蛋、冰雞蛋白、冰雞蛋黃)
2.2.1.1　按2.1.1解凍和保存樣品。
2.2.1.2　以無(wú)菌操作稱(chēng)取樣品25 g,型于盛有225 mL四硫磺酸鹽煌綠增菌液的500mL廣口瓶?jì)?混合均勻,如pH低于6.6,用滅菌1 mol/L氫氧化鈉溶液調pH至6.8±0.2,于37℃培養24±2 h,進(jìn)行直接選擇性增菌。
2.2.2　干蛋品(雞全蛋粉、雞蛋白片、雞蛋白粉、雞蛋黃粉)
　以無(wú)菌操作將樣品碾碎后,稱(chēng)取25g加入盛有225 mL緩沖胨水增菌液的500 mL廣口瓶?jì)?瓶?jì)仁孪仁⒂兄睆?～4mm的玻璃珠約50粒),振蕩10min,如pH低于6.6,用滅菌1mol/L 氫氧化鈉溶液調pH至6.8±0.2,于37℃培養20～24h,進(jìn)行前增菌；其后,移取10 mL轉種于盛有100mL 亞硒酸鹽胱氨酸增菌液的250 mL玻璃瓶?jì)?混勻,于42±1℃培養20±2h,進(jìn)行選擇性增菌。
3　分離培養
3.1　將增菌培養液搖勻,以無(wú)菌操作,用直徑3mm的接種環(huán)分別挑取1環(huán),分別劃線(xiàn)于表面無(wú)凝結水的亞硫酸鉍和膽硫乳瓊脂平板各一個(gè)(必要時(shí)亞利桑那菌瓊脂平板可參照使用), 于37℃培養24±2h。
3.2　觀(guān)察各瓊脂平板上有無(wú)典型或可疑沙門(mén)氏菌屬的菌落,如無(wú)典型或可疑菌落,應再繼續培養24±2h。

沙門(mén)氏菌屬的菌落特征見(jiàn)表1。

表1　沙門(mén)氏菌屬菌落特征
瓊脂 平板	菌 落 特 征
	沙 門(mén) 氏 菌	亞 利 桑 那 菌
亞硫酸鉍瓊脂	棕褐色或灰色至黑色,有時(shí)有金屬光澤,周?chē)�培養基呈棕色或黑色,有些菌株呈灰綠色,周?chē)�培養基不變或微變暗	黑色,周?chē)�培養基一般不變黑或微變黑。有些菌株呈灰綠色,帶黑心或不帶黑心
膽硫乳瓊脂	無(wú)色半透明有黑色中心或幾乎全為黑色。有些菌株無(wú)色半透明中心	乳糖陰性菌株,相似于沙門(mén)氏菌菌落,乳糖陽(yáng)性菌株為粉紅色有暗色
亞利桑那菌瓊脂	黃色有暗藍色中心,周?chē)�培養基中有黃色沉淀物包圍時(shí),菌落緣可為淺黃色	粉紅色有黑色中心,有時(shí)為全黑色，周?chē)�培養基呈紅色,被發(fā)酵衛矛醇或庶糖的細菌

              

 

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