出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法——1

1主題內容與適用范圍　　
本標準規定了出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌的檢驗方法�！　�
本標準適用于出口食品的檢驗。
2設備和材料
2.1吸管: 1mL,具0.1mL刻度；5mL和10mL,具1mL刻度。 
2.2水浴箱：44.5±0.5℃。
2.3培養箱：36±1℃,44.5±0.5℃。
2.4冰箱: 0～5℃和-15～-20℃。 
2.5均質(zhì)器。 
2.6乳缽和研棒。
2.7平皿：直徑90mm。
2.8天平：感量0.1g。 
2.9顯微鏡。 
2.10稀釋瓶：100mL、200mL和500mL三角燒瓶及廣口瓶。
2.11玻璃珠：直徑約5mm。 
2.12菌落計數器。 
3培養基及試劑 
3.1月桂基硫酸鹽胰蛋白(月示)(LST)肉湯。 
3.2煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯。 
3.3 EC 肉湯。
3.4伊紅美藍瓊脂(EMB)。 
3.5營(yíng)養瓊脂斜面。 
3.6色氨酸肉湯。 
3.7 MR-VP培養基。 
3.8 Korser氏枸椽酸鹽肉湯。 
3.9結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)。 
3.10Butterfield 氏磷酸鹽緩沖稀釋液。 
3.11 生理鹽水。 
3.12 革蘭氏染色液。 
3.13 Kovacs氏靛基質(zhì)試劑。 
3.14 甲基紅指示劑。 
3.15 Voges-pros kauer(V-P)試劑。
4樣品制備 
4.1以無(wú)菌操作取有代表性的樣品。如有包裝則用75％乙醇在開(kāi)口處擦拭后取樣。若不能及時(shí)檢驗,應將冷凍樣品置于-15℃保存；非冷凍而易腐的食品,應置于4℃冰箱保存。檢驗前冷凍樣品可于2～5℃ 18h內解凍,或在45℃以下15min內解凍。
4.2不同食品樣品勻液的制備 
4.2.1液體食品 以滅菌吸管取樣25mL放入裝有225mL稀釋劑的滅菌玻璃瓶(瓶?jì)阮A置適當數量的玻璃珠), 以30cm幅度、于7s內振搖25次(或以機械振蕩器振搖),制成1:10的樣品勻液。
4.2.2固體和半固體食品：以無(wú)菌操作取25 g樣品,放入裝有225 mL稀釋劑的滅菌均質(zhì)杯內,于8000r/min均質(zhì)1～2min,制成1:10樣品勻液(也可用滅菌乳缽研磨的方法代替)。 
4.3稀釋樣品勻液根據對樣品污染情況的估計,用稀釋劑將樣品勻液制成一系列十倍遞增的樣品稀釋液,如10**-2、10**-3、10**-4……。從制備樣品勻液至稀釋完畢,全過(guò)程不得超過(guò)15min。    
   

 

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