我國行業(yè)標準-出口食品中霍亂弧菌檢驗方法——2.0

錄入時(shí)間:2008-12-25 13:42:51 來(lái)源：青島海博生物

                附錄 A   培養基和試劑的配制
A1  堿性蛋白胨水（APW）
蛋白胨                10.0g　　
氯化鈉                10.0g　　
蒸餾水　              1 000mL 　　
混勻后，調節pH值至（8.5±0.2），分裝225mL于250mL廣口瓶中，121℃高壓滅菌10min。
A2  TCBS瓊脂
酵母浸膏　　               5.0g　　
蛋白胨　　　               10.0g
蔗　糖　　　               20.0g　　
硫代硫酸鈉·5H2O 　         10.0g
檸檬酸鈉 ·2H2O　           10.0g
牛膽酸鈉                    3.0g　　
牛膽汁                      5.0g　
氯化鈉　                　 10.0g　　
檸檬酸鐵　                  1.0g　　
溴麝香草酚藍　              0.04g　　
麝香草酚藍                  0.04g
瓊　脂　　                 18.0g
蒸餾水　　                 1 000mL
除指示劑外,將各種成分加熱溶解,調至pH8.6,加入指示劑。此培養基不必高壓滅菌,煮沸1～2min,分裝20mL于15mm×100mm平皿內。
A3  三糖鐵瓊脂（TSI）
牛肉浸膏　　                3.0g
蛋白胨　　                 20.0g
乳糖　　                  10.0g
蔗　糖　　                 10.0g
葡萄糖　                    1.0g
硫酸亞鐵                    0.5g
氯化鈉　　                 30.0g
瓊　脂　　                 12.0g
酚　紅　　　                0.024g
除瓊脂和酚紅外,將其他成分用蒸餾水400mL微火加熱溶解,同時(shí)將瓊脂置于600mL蒸餾水中,浸泡數分鐘后,加熱煮沸使完全溶解。然后將以上兩液混合均勻。調至pH7.4,  加入指示劑混勻,分裝于15mm×150mm試管,每管3mL～4mL,115℃高壓滅菌15min。滅菌后擺成斜面,使高層和斜面各約3cm。
A4  雙糖鐵瓊脂（KIA）
牛肉浸膏                   3.0g
酵母膏　　　　　　         3.0g
月示蛋白胨　　　　         15.0g
蛋白胨                      5.0g　　
         乳糖　　　　　　　          5.0g　　
         葡萄糖　　　　　　          1.0g
硫酸亞鐵                    0.2g　　
         氯化鈉　　　　　　          20.0g　　
         硫代硫酸鈉　　　　          0.3g　　
         瓊脂　　　　　　　          12.0g　　
         酚紅　　　　　　　          0.024g　　
        蒸餾水　　　　　　          1 000mL　　
   將各成分溶解于蒸餾水中，充分混勻，攪拌加熱，煮沸約1min。最終pH（7.4±0.2）。分裝13mm×100mm試管，121℃高壓滅菌15min。放置高層斜面備用。

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