1、主題內容與適用范圍
本標準規定了海產(chǎn)食品中副溶血性弧菌檢驗方法!
本標準適用于海產(chǎn)食品中副溶血性弧菌檢驗,其他食品可參照使用。
2、設備與材料
2.1 試管:17mm×170mm、15mm×150mm、10mm×100mm。
2.2 吸管:1mL、10mL。
2.3 培養皿:直徑90mm。
2.4 廣口瓶或三角瓶。
2.5 電動(dòng)均質(zhì)器。
2.6 電動(dòng)試管振蕩器。
2.7 37℃恒溫箱。
2.8 42℃恒溫水浴箱。
2.9 試管架。
3、培養基及試劑
3.1 30g/L氯化鈉稀釋液:見(jiàn)9.1。
3.2 60g/L氯化鈉蛋白胨水(PW):見(jiàn)9.2。
3.3 氯化鈉多粘菌素B肉湯(SPB):見(jiàn)9.3。
3.4 硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、膽鹽、蔗糖瓊脂(TCBS):見(jiàn)9.4。
3.5 氯化鈉三糖鐵瓊脂(TSI):見(jiàn)9.5。
3.6 嗜鹽性試驗用胰胨水(TB):見(jiàn)9.6。
3.7 胰胨大豆瓊脂斜面(TSA):見(jiàn)9.7。
3.8 靛基質(zhì)試驗用培養基(I):見(jiàn)9.8。
3.9 氨基酸試驗用培養基:見(jiàn)9.9。
3.10 V-P半固體瓊脂(VP):見(jiàn)9.10。
3.11 糖類(lèi)分解試驗用培養基:見(jiàn)9.11。
3.12 42℃生長(cháng)試驗用培養基:見(jiàn)9.12。
3.13 O/F試驗用培養基(HLGB):見(jiàn)9.13。
3.14 神奈川現象試驗用我妻氏瓊脂(WA):見(jiàn)9.14。
4 樣品制備
4.1 冷凍樣品應在45℃以下不超過(guò)15min或在2~5℃不超過(guò)18 h解凍。若不能及時(shí)檢驗, 應放于—15℃左右保存;非冷凍而易腐的樣品應盡可能及時(shí)檢驗,若不能及時(shí)檢驗,應置于6~10℃冰箱保存,在24 h內檢驗。
4.2 取樣:以無(wú)菌操作進(jìn)行。
4.2.1 魚(yú)類(lèi):取魚(yú)體不同部位。
4.2.2 貝類(lèi):取內臟或含內臟的全部貝肉;如為帶殼貝類(lèi),則應先在清潔的流水中洗刷凈外殼,然后以無(wú)菌操作打開(kāi)貝殼,取出內臟或含內臟的全部貝肉和貝液。
4.2.3 甲殼類(lèi):取包括鰓及腸的部分或整體。
4.3 以無(wú)菌操作稱(chēng)取50g檢樣放于均質(zhì)杯中,以滅菌剪刀充分剪碎。
4.4 加30 g/L氯化鈉稀釋水450mL,均質(zhì)(8 000 r/min)1min,使成1:10稀釋液(如無(wú)均質(zhì)器,則應以剪刀盡量剪碎,加450mL稀釋水使成1:10稀釋液,并充分振蕩)。
4.5 用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入裝有9mL30 g/L氯化鈉稀釋水的試管內,振搖試管混合均勻,制成1:100稀釋液。
4.6 每一稀釋度換取1支1 mL滅菌吸管,按上項操作順序進(jìn)行10倍遞增稀釋。稀釋倍數要依據有關(guān)標準、規定、要求或樣品污染情況而定。
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