出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法——1

               出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法 
        中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗行業(yè)標準SN 0172-92
代替 ZB X09 003-86Method for detection of staphylococcusaureus in food for export    
1　主題內容與適用范圍　　
本標準規定了出口食品中金黃色葡萄球菌的檢驗方法�！　�
本標準適用于出口食品的檢驗。
2　設備和材料 
2.1　供常規平板計數用的基本設備與材料。 
2.2 L形玻璃棒。 
3　培養基和試劑 
3.1　普通肉湯培養基。 
3.2　胰蛋白胨大豆肉湯。 
3.3 Baird-Parker培養基。 
3.4　甲苯胺藍-DNA瓊脂。
3.5　生理鹽水。
3.6　凝固酶試驗兔血漿。
4　樣品制備 
4.1　固體或半固體食品: 以無(wú)菌操作稱(chēng)取25g樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌均質(zhì)杯內,于8000r/min均質(zhì)1～2min,制成1:10樣品勻液。 
4.2 液體食品: 用滅菌吸管吸取25mL樣品,放入裝有225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶?jì)?瓶?jì)阮A置適當數量的玻璃珠),經(jīng)充分振搖制成1:10樣品勻液。 
4.3　供計數檢驗時(shí),可按十進(jìn)位遞增稀釋法將樣品勻液再進(jìn)行適當稀釋。 
5　檢驗步驟 
5.1　最近似值(MPN)測定法 　　適用于檢測認為帶有大量競爭菌的食品及其原料和未經(jīng)處理的食品中的少量金黃色葡萄球菌。 
5.1.1　選三個(gè)連續稀釋度,從每個(gè)稀釋度分別取1 mL稀釋樣品液,接種3管含10％氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯。樣品的最高稀釋度必須達到能獲得陰性終點(diǎn),置36±1℃培養48 h。 5.1.2　用3 mm接種環(huán),從有細菌生長(cháng)的各管中移取1 環(huán),劃線(xiàn)接種于表面干燥的Baird-Parker瓊脂平板,置36±1℃培養45～48h。 
5.1.3 從有細菌生長(cháng)的每一平板上至少挑取1個(gè)可疑金黃色葡萄球菌菌落[見(jiàn)附錄B(參考件)],移種到肉湯培養基中,置36±1℃培養20～24 h。
5.1.4　取肉湯培養物0.3mL同0.5mL凝固酶試驗兔血漿于8mm×100mm試管內充分混合,置36±1℃培養,定時(shí)觀(guān)察是否有凝塊形成,至少觀(guān)察6 h,以?xún)热菸锿耆�凝�?使試管倒置或傾斜時(shí)不流動(dòng)者為陽(yáng)性。試驗中需同時(shí)做巳知陽(yáng)性和陰性對照。對可疑結果,應進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗{如耐熱核酸酶試驗[見(jiàn)附錄C (補充件)]等} 加以證實(shí)。 
5.1.5 報告結果 　　
根據凝固酶試驗結果查最近似值(MPN)表 [見(jiàn)附錄D (補充件)],報告金黃色葡萄球菌的MPN/g (mL)。    

 

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