中華人民共和國國家標準 生活飲用水標準檢驗方法微生物指標——4，5

5.1.4.4鏡檢  打開(kāi)顯微鏡和汞燈。預熱10min后，在200倍的熒光顯微鏡下檢查，在400倍的熒光顯微鏡下進(jìn)一步證實(shí)。井將全井進(jìn)行記數。  賈第鞭毛蟲(chóng)的袍囊是橢圓形的它們的長(cháng)度為8um-14um，寬度為7um-10um。抱囊壁會(huì )發(fā)出蘋(píng)果綠的熒光。在紫外光下，DAPI陽(yáng)性抱囊會(huì )出現4個(gè)亮藍色的核。隱抱子蟲(chóng)的卵囊為稍微橢圓的圓形。它們的直徑為2um-6um。卵囊壁會(huì )發(fā)出蘋(píng)果綠的熒光在紫外光下．DAPI陽(yáng)性卵囊會(huì )出現4個(gè)亮藍色的核計數整個(gè)井面，呈現表6特征的就是抱（卵）囊。
5.1.5結果的計算、報告和檢測限5.1.5.1用式（5）報告每升樣本中的抱（卵）囊數：Y一（X*V ) / ( V1*V2 · · · · · · · … （5 )式中：y每升水中抱囊或卵囊的數目；X― 計數樣本的體積中抱囊或卵囊的數目；V― 離心后再懸浮的體積，單位為毫升（mL ) ;V1― 計數樣本的體積，單位為毫升（mL ) ;V2― 過(guò)濾后水的體積，單位為升（L ) ;5.1.5.2用式6計算分析的檢測限：D一V / ( V1*V2）· · · · （6 )式中：D一一每升抱囊或卵囊的檢測限；V― 離心后再懸浮的體積，單位為毫升（mL ) ;V1― 計數樣本的體積，單位為毫升（mL ) ;V2一過(guò)濾后水的體積，單位為升（I .）。5.1.6質(zhì)量控制5.1.6.1免疫熒光質(zhì)量控制免疫熒光試劑盒的控制必須每個(gè)星期做一次它由兩個(gè)試驗組成：一個(gè)陽(yáng)性對照和一個(gè)陰性對照
5.1.6.2陰性對照5.1.6.2.1制準備一個(gè)井形載玻片。5.1.6.2.2加50uL蒸餾水，然后將它放在培養箱中干燥。5.1.6.2.3參照5.1.4.3染色5.1.6.2.4對整個(gè)井面進(jìn)行計數。不得找出任何賈第鞭毛蟲(chóng)囊和隱抱子蟲(chóng)的卵囊。5.1.6.3陽(yáng)性對照5.1.6.3.1制備一個(gè)井形載玻片5.1.6.3.2渦旋儲存的原蟲(chóng)2min。5.1.6.3.3在同一井中攙加5uL賈第鞭毛蟲(chóng)囊和5uL隱抱子蟲(chóng)卵囊陽(yáng)性樣本，然后將它放在培養箱中干燥。5.1.6.3.4參照5.1.4.3染色。5.1.6.3.5對整個(gè)井面進(jìn)行計數。必須找到根據表6中描述的規則而均勻染色的抱囊和卵囊5.1.6.4整個(gè)程序的質(zhì)量控制整個(gè)步驟（從采樣到質(zhì)量控制顯微鏡檢查）的質(zhì)量控制應每三個(gè)月做一次。它由兩個(gè)試驗組成：分析ZoL加有原蟲(chóng)的水作為陽(yáng)性對照，分析20L的蒸餾水作為陰性對照。5.1.6.4.1陰性對照A加201蒸餾水到小口塑料瓶中。B與樣品分析一樣分析蒸餾水。不得找到任何賈第鞭毛蟲(chóng)或隱抱子蟲(chóng)將所有結果記錄在表7原蟲(chóng)測定方法質(zhì)量控制表格中5.1.6.4.2陽(yáng)性對照為了做陽(yáng)性對照，應在20l蒸餾水中攙加已知數量的囊和卵囊。用血球計數器和用染色的井形載玻片．測定在201蒸餾水中加人的飽囊和卵囊的數量A原蟲(chóng)接種液的計數渦旋2min儲存的原蟲(chóng)。b在一個(gè)有10ml蒸餾水的燒杯中加一些抱囊和卵囊，以便得到一個(gè)最終濃度大約每ml50000護個(gè)抱（卵）囊的溶液。用磁棒攪拌30min。d用血球計數器測定這種溶液的濃度10次e用染色的井形載玻片［加大約250個(gè)抱〔 卵）囊到井上」測定這種溶液的濃度5次。計數這兩種方法的濃度和標準差。如果標準差小于25 %，那么就可以把這個(gè)讀數看作是正確的。如果標準差大于25 %，就要制備新的原蟲(chóng)接種液，然后再測定它的濃度。B陽(yáng)哇對照的分析在裝有101，蒸餾水的小口塑料瓶中加500個(gè)賈第鞭毛蟲(chóng)的抱囊和500個(gè)隱抱子蟲(chóng)的卵囊。b用濾囊過(guò)濾該水用10L蒸餾水沖洗小口塑料瓶，然后用同一個(gè)濾囊過(guò)濾該水。d分析這個(gè)樣品要象分析一個(gè)典型的樣品一樣將所有結果記錄在表7中。這種方法的回收率為10％一100％之間如不在此范圍，需檢查所有的設備和試劑，同時(shí)再做一個(gè)陽(yáng)性對照5.1.6.5免疫灸光質(zhì)，控制記錄原蟲(chóng)測定方法質(zhì)量控制記錄到表7中   
   

 

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