【原理】 原發(fā)性非典型性肺炎患者血清中常產(chǎn)生冷凝集素。冷凝集素是一種自身抗體，在寒冷（4℃）情況下，可與紅細胞抗原起反應，一般可與O型人紅細胞或自身紅細胞發(fā)生凝集反應，可用于該病的輔助診斷。冷凝集反應具有可逆性，若將已凝集的紅細胞再放回37℃時(shí)，凝集現象即消失。
【材料】
1、患者血清：切勿將血液放在冰箱內析出血清，在冬季室溫低于-20℃時(shí)，可將標本置于37℃孵箱析出血清，隨即分離進(jìn)行實(shí)驗。
2、人紅細胞懸液：“0”型血或患者自身的抗凝血以無(wú)菌,0.9%氯化鈉溶液稀釋至2%。
【方法】
1、于試管架上排列小試管10支，每管內各加0.9%氯化鈉溶液0.5ml。
2、加患者血清0.5ml于第1管內混勻后，吸出0.2ml加入第2管內，順次連續稀釋至第9管，混勻后棄去0.5ml。第10管不加血清作為對照。
3、每管內各加入25血細胞懸液0.2ml，振蕩混合后，置冰箱內24小時(shí)或過(guò)夜。此時(shí)各管血清最終稀釋度依次為1:4，1:8，1；16，1：32，1：64，1：128，1;256，1:512，1；1024
【結果】
1、冷凝集有可逆性，在較暖的室溫中，凝集現象迅速消失，故在冰箱內取出試管后，應立即觀(guān)察結果。
2、取出時(shí)盡量避免震動(dòng)，先觀(guān)察管底紅細胞沉淀形狀，再輕搖試管，如有明顯的凝集現象，記錄凝集效價(jià)。
3、對照管內的紅細胞，輕搖后應完全分開(kāi)，無(wú)凝集現象。
4、如遇陽(yáng)性結果，最好將試管再放入37℃水浴箱內5—30分鐘，重新觀(guān)察一次，如紅細胞完全分散，凝塊消失，則證實(shí)為真正的冷凝集現象，否則可能由于其他凝集素所致，不作陽(yáng)性報告。
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