熒光密螺旋體抗體吸收實(shí)驗用Nichols株梅毒螺旋體抗原懸液在玻片上涂成菌膜，吸附待檢血清中的lgG抗體，再用熒光素標記的羊抗人lgG抗體，顯示待檢血清中含有的抗螺旋體抗體。因待檢血清預先經(jīng)吸附劑去除了非特異性抗體，故特異性較高。一般用于篩選實(shí)驗陽(yáng)性標本的確診實(shí)驗。
1、操作步驟
（1）抗原片制備：Nichols株梅毒螺旋體（每高倍視野20條）抗原懸液，在玻片上涂數個(gè)直徑為5mm的菌膜，干后以甲醇固定。
（2）待檢血清預處理：待檢血清先經(jīng)56%30分鐘滅活，取50ul血清與200ul吸附劑（Reiter株非致病密螺旋體）混勻，37℃作用30分鐘，以充分吸除非特異性抗體。
（2）夾心法熒光顯色：吸附后的待檢血清用磷酸鹽緩沖液（PBS）作1;20—1:320的倍比稀釋?zhuān)瑢⑾♂尯蟮难宸謩e滴加于抗原菌膜上，置濕盒內37℃孵育30分鐘，然后用PBS洗片，并將玻片在PBS中浸洗，換液3次，每次5分鐘，吹干。各抗原反應片上滴加工作濃度熒光素標記的羊抗人lgG抗體，置濕盒37℃孵育30分鐘，再用PBS按前法洗片，干后用甘油緩沖液封片。
（3）熒光顯微鏡觀(guān)察：每次實(shí)驗設陽(yáng)性、陰性、非特異性血清對照。陰性標準血清無(wú)熒光菌體或偶爾見(jiàn)熒光菌體出現：陽(yáng)性對照可見(jiàn)多數（高倍視野15條）熒光菌體出現。并以此為參照作出待檢標本的判定。
結果判定：陽(yáng)性結果參照陽(yáng)性標準血清的熒光強度判定：半數高倍視野（10條左右）出現熒光，則為（+ +），多半視野呈熒光（15條左右 ）則為（+ + +），全部（約20條）出現強熒光則為（+ + + +）�！翱梢伞苯Y果參照非特異性血清的熒光強度判定為（+ +）或（+），陰性結果參照陰性對照血清判定為（-）或（+）。
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