白喉棒狀桿菌毒力實(shí)驗

   由于只有帶β-棒狀桿菌噬菌體的白喉棒狀桿菌才產(chǎn)生外毒素。因此，判斷從標本中分離出的白喉棒狀桿菌是否具有致病性，必須做毒力實(shí)驗，其方法有下列兩種。 
瓊脂平板毒力實(shí)驗（Elek平板毒力實(shí)驗） 
    將含白喉抗毒素的濾紙條貼于Elek平板上，再在培養液上與濾紙條垂直劃線(xiàn)接種白喉棒狀桿菌，如為產(chǎn)毒株，則白喉棒狀桿菌產(chǎn)生的毒素（抗原）與白喉抗毒素在比例適當處結合，產(chǎn)生免疫沉淀反應，生成乳白色沉淀線(xiàn)。                 
【材料】 
1、白喉棒狀桿菌標準產(chǎn)毒株及類(lèi)白喉桿菌呂氏血清斜面24時(shí)培養物。 
2、待測菌株。 
3、Elek培養液。 
4、白喉抗毒素（500U/ml）、無(wú)菌兔血清或豬血清、滅菌濾紙條（75mm*5mm）。 
【操作】 
1、取Elek培養液15ml，加熱融化，待冷至50—55℃時(shí)，加入3ml無(wú)菌兔血清或豬血清，立即混勻，傾入無(wú)菌平皿中。 
2、待瓊脂凝固后，將浸有白喉抗毒素（500U/ml）的濾紙條（75mm*5mm）放于平板中央，將平板置37℃溫箱中1—2小時(shí)，以使培養液表面干燥 。 
3、將待測細菌分別與濾紙條成垂直方向作劃線(xiàn)接種。測定未知標本時(shí)應同時(shí)用陽(yáng)性（白喉棒狀桿菌）及陰性（類(lèi)白喉桿菌）作對照。 
4、將平板置37℃溫箱培養18—24h小時(shí)后觀(guān)察結果，觀(guān)察在接種線(xiàn)與濾紙間有無(wú)可見(jiàn)的乳白色沉淀線(xiàn)。    
   

 

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