1、準備自冰箱中取出試劑后，應置室溫平衡20—30分鐘使用。
2、配洗滌液以蒸餾水稀釋濃縮洗滌液即可。
3、稀釋標本在小試管內加稀釋液100ul、再加蒸餾水400ul混勻，作為應用稀釋液。加被檢血清5ul（1：100）；尿和腦脊液不經(jīng)稀釋而直接加50ul入孔內；胸腹水取25ul于0.5ml應用稀釋液中（1：20稀釋?zhuān)孕�、腹水�?;10稀釋即可）混勻。
4、加樣本分別吸取稀釋樣本50ul于酶標條孔內，并設臨界和陽(yáng)性對照各1孔，分別加入臨界血清、陽(yáng)性血清50ul，37℃水浴10分鐘，洗滌液洗滌3次，每次1分鐘，于吸水紙上拍干。
5、加酶結合物每孔加酶標記抗體應用液1滴，置37℃水浴1分鐘，洗滌液沖洗6次，每次1分鐘，于吸水紙上拍干。
6、加底物及終止反應每孔加底物I1滴、底物II1滴，37℃水浴1分鐘，每孔再加終止液1滴終止反應，混勻后判斷結果。
【結果】
1、抗體-lgM的檢測加終止液后，以空白對照孔校零，在波長(cháng)450nm處讀取各孔的吸光值（A），凡A值>陰性對照孔均數的2倍的樣品孔，即為陽(yáng)性。
2、抗體-lgM的檢測
目測法：呈現藍色深于臨界孔者為陽(yáng)性，可按呈色深淺判定（+）——（+ + + +）表示陽(yáng)性程度（陽(yáng)性對照孔為+ +）。
比色法：每孔加終止液終止后用450nm波長(cháng)進(jìn)行比色計算，報告單位數。
測定單位=測定孔OD值 *100/臨界孔OD值 （>100單位者為陽(yáng)性）
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