涂片染色能查到結核分枝桿菌者，一般需要每毫升痰液內含菌量至少500個(gè)以上，甚至需達到5萬(wàn)以上，所以結核患者痰標本直接涂片染色陽(yáng)性率很低，經(jīng)濃縮集菌后再進(jìn)行染色鏡檢可顯著(zhù)提高檢測的陽(yáng)性率。
【材料】 結核患者24小時(shí)痰液，細口瓶，0.02%酚紅液、汽油或二甲苯，0.5%或4%氫氧化鈉，無(wú)菌0.9%氯化鈉溶液等。
【方法】
一、漂浮法
1、取24小時(shí)痰液15ml，裝入細口瓶?jì)�，加�?倍量0.5%氫氧化鈉搖勻，高壓滅菌或煮沸20—30分鐘殺菌。
2、待冷后加人汽油或二甲苯2ml，用力振蕩20—30分鐘，用0.9%氯化鈉溶液加至液面與瓶口齊，靜置半小時(shí)。
3、取瓶口表面油狀物涂于載玻片上，微微加熱，干后再加，如此重復5—6次，至厚度適宜，烘干待冷，抗酸染色后鏡檢。
二、沉淀法
1、取痰液1份與2倍量4%氫氧化鈉混合，高壓滅菌或煮沸20—30分鐘后，加入0.02%酚紅指示劑0.1ml，劇烈振蕩混勻，亦可置37℃水浴消化30分鐘。
2、校正pH為7.0，3000r/min離心30分鐘，棄去上清液。
3、取沉淀物涂片染色鏡檢。若進(jìn)行分離培養和動(dòng)物接種，則應免去高壓滅菌或煮沸的程序。
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