結核患者痰標本抗酸染色

   臨床標本結核分枝桿菌檢查主要有直接涂片抗酸染色、細菌培養、聚合酶鏈反應（PCR）、抗體檢測、動(dòng)物接種等多種方法。直接涂片法即取患者標本直接涂片抗酸染色后鏡檢，此法簡(jiǎn)便迅速，但要求標本中結核分枝桿菌量多，并要注意與非結核分枝桿菌區別。開(kāi)放性肺結核患者的痰中常含有結核分枝桿菌，如取痰液直接涂片、染色鏡檢找到抗酸桿菌，可作初步診斷。 
【材料】痰標本、載玻片、石炭酸復紅染色液、3%鹽酸乙醇、美藍染色液、金胺染色液、0.5%氫氧化鈉。 
【方法】 
                                直接染色法 
1、收集患者清晨咳痰，用接種環(huán)挑取痰液中干酪樣壞死小塊或帶血小塊，制成厚涂片，干燥后火焰固定。 
2、用過(guò)的接種環(huán)須用75%乙醇充分清洗，或放入沸水中煮沸數分鐘，將接種環(huán)上的細菌殺死，然后方可在乙醇燈上進(jìn)行燒灼滅菌；或者先將接種環(huán)置乙醇燈火焰旁烘烤片刻，再置于外焰中燒灼滅菌，嚴禁將取標本后的接種環(huán)直接放在火焰上滅菌，以防止痰液受熱后突然炸裂，使尚未死亡的結核分枝桿菌隨之播散。 
3、將制好的涂片進(jìn)行抗酸染色或金胺染色。 
4、染色后將涂片置油鏡下或熒光顯微鏡下觀(guān)察，注意觀(guān)察形態(tài)、排列方式及染色性。 
                                濃縮集菌法  
【報告方式】 
1、直接涂片法的報告方式 
-：仔細觀(guān)察300個(gè)視野（觀(guān)察時(shí)間不少于4分鐘）未發(fā)現抗酸桿菌。 
+ -：100個(gè)視野內發(fā)現1—2個(gè)抗酸桿菌。 
+：100個(gè)視野內發(fā)現3—9個(gè)抗酸桿菌。 
+ +：100個(gè)視野內發(fā)現10—99個(gè)抗酸桿菌。 
+ + +：每個(gè)視野內發(fā)現1—9個(gè)抗酸桿菌。 
+ + + =：每個(gè)視野內發(fā)現10個(gè)以上抗酸桿菌。 
2\集菌涂片應按“發(fā)現抗酸桿菌”或“未發(fā)現抗酸桿菌”方式報告。   
   

 

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