塑料板法肥達實(shí)驗

【原理】同試管法。 
【材料】10*6孔塑料板，其他同試管法。  
【方法】 
1、取10*6孔塑料板1塊（每排10孔，共6排），于每排第1孔左側分別標明“H、O、 
A、B”以表示各排孔中將分別加入傷寒沙門(mén)菌鞭毛抗原（H）、傷寒沙門(mén)菌菌體抗原（O）、甲型副傷寒沙門(mén)菌鞭毛抗原（A）、肖氏沙門(mén)菌鞭毛抗原（B）。 
2、血清預稀釋取可疑患者血清0.4ml，加至1.2ml0.9%氯化鈉溶液中，混勻即得1：4稀釋的血清。 
3、稀釋血清：用1ml吸管從裝有1.6ml1：4可疑患者血清的試管中吸取0.8ml放入塑料板每排第1孔，每孔0.2ml。再用另一吸管取1.2ml0.9%氯化鈉溶液加入上述試管中作對倍稀釋?zhuān)�即�?：8的血清，另?yè)Q吸管吹吸混勻，再取0.8ml放入每排的第二孔，每孔0.2ml。如此操作至每排第6孔止。每排孔內血清原始稀釋度分別為1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128。 
4、于每排第7孔各加0.9%氯化鈉溶液0.2ml，作為抗原對照。 
5、加抗原于第1排各孔加傷寒沙門(mén)菌鞭毛抗原（H），于第2排各孔加傷寒沙門(mén)菌菌體抗原（O），于第3排各孔加甲型副傷寒沙門(mén)菌鞭毛抗原（A），于第4排各孔加入肖氏沙門(mén)菌鞭毛抗原（B），每孔均為0.2ml。加入菌液后，每孔血清又稀釋1倍，故血清最終稀釋度應為1：8、1：16、1：32、1：64、1：128、1：256。 
6、將塑料板輕輕來(lái)回搖動(dòng)，使抗原與血清充分混勻，置室溫下，15min分鐘后觀(guān)察結果。記錄方法參見(jiàn)試管法。 
【注意】因塑料板法所用的抗原及血清均較試管法濃縮10倍，因此，在確定血清效價(jià)后應擴大10倍，使其與試管法結果報告一致。例如塑料板法為1：8，則報告為1：80.   
   

 

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