血清學(xué)實(shí)驗

   在細菌的血清鑒定中，最常使用的方法是凝集反應，其基本原理是細菌為顆粒性抗原，當與相應的抗體混合時(shí)，在一定濃度的電解質(zhì)條件下，可出現肉眼可見(jiàn)的凝集現象。 
   玻片法凝集實(shí)驗是用診斷血清在玻片上與待測細菌相混合，在電解質(zhì)存在下，若出現肉眼可見(jiàn)的凝集小塊即為陽(yáng)性，表示該菌為所用抗體的相應細菌。此法是一種定性實(shí)驗，方法簡(jiǎn)便快速，特異性強�？捎糜阼b定菌種及菌型。用于鑒定細菌的診斷血清有以下幾種： 
1、多價(jià)診斷血清：即混合診斷血清。該血清含有兩種（或型）以上細菌的相應抗體。一般用于細菌定群或初步分型。 
2、單價(jià)診斷血清僅含一種（或型）細菌的相應抗體�？捎糜诩毦�的定種（或型）。 
3、因子診斷血清細菌含有多種抗原成分，而且不同菌群細菌之間可有共同的抗原成分。因此，通過(guò)凝集吸收實(shí)驗，將抗血清中的共同抗體除掉，僅含一種特異性抗體的診斷血清稱(chēng)為因子血清�？捎糜诩毦�分型。 
【材料】 
1、菌種豬霍亂沙門(mén)菌。 
2、診斷血清沙門(mén)菌A-E多價(jià)血清，定群的6個(gè)O群因子血清（A群-O2、B群-O4、C1群-O7、C2群-08、D群-09、E群-03、10），定型的H因子血清。 
3、其他：0.9%氯化鈉溶液、載玻片等。 
【操作】 
1、取一潔凈載玻片，用記號筆劃兩個(gè)1—1.5cm的圓圈。 
2、取1：5或1：10診斷血清一接種環(huán)置于玻片左側圈內，在右側圈內放一接種環(huán)0.9%氯化鈉作為對照。如天氣炎熱，環(huán)境溫度高，則應適當多取血清及0.9%氯化鈉，以防試劑短時(shí)間內干涸，影響結果的觀(guān)察。 
3、用接種環(huán)取待鑒定的新鮮細菌少許，分別研磨乳化于診斷血清及0.9%氯化鈉內使之均勻混合。旋轉搖動(dòng)玻片數次，1—3分鐘后觀(guān)察結果。 
   按上述操作方法，依次分別做A-E多價(jià)血清定屬，特異性O因子血清定群，H因子血清定型（或種）。 
【結果】 
陰性：對照側及實(shí)驗側均勻混濁不出現凝集。 
陽(yáng)性：鹽水對照側呈現均勻混濁，實(shí)驗側明顯凝集。 
自凝：對照側及實(shí)驗側均出現凝集。 
    臨床標本的檢測，常常還需要加作一個(gè)陽(yáng)性對照。觀(guān)察結果時(shí)，先觀(guān)察陰性對照及陽(yáng)性對照，兩個(gè)對照結果均符合實(shí)驗設計時(shí)，再觀(guān)察實(shí)驗孔。    
   

 

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