糞便標本的細菌學(xué)檢查——2

三、方法 
1、增菌及分純將疑為沙門(mén)菌感染患者或帶菌者之糞便標本接種至TT增菌液中進(jìn)行增菌；疑為痢疾患者或帶菌者的糞便標本接種至GN肉湯增菌液中進(jìn)行增菌，置37℃培養6—8h小時(shí)進(jìn)行增菌。如果根據標本性狀，估計標本中致病菌數量較多，則可省去此步，直接作分純培養，即將標本分別直接劃線(xiàn)接種至麥康凱及SS瓊脂平板等弱強選擇性培養液上，置37℃培養18—24h小時(shí)（每一個(gè)標本同時(shí)接種一個(gè)強選擇性培養液和一個(gè)弱選擇性培養液）。 
2、生化反應鑒定第2日觀(guān)察平板上有無(wú)可疑菌落，用接種針于上述平板中挑取單個(gè)可疑菌落（無(wú)色、半透明、光滑、較�。�2—3個(gè)，分別接種至2—3管雙糖培養液內，置37℃培養18—24h。第3日觀(guān)察細菌生長(cháng)情況，根據表10—2初步鑒定細菌種類(lèi)，然后取雙糖培養液上 的菌落進(jìn)行系列生化鑒定。 
          表     不同腸道細菌在雙糖培養液培養結果（教學(xué)實(shí)驗模擬標本的結果） 
     序號      上層（乳糖）   下層（葡萄糖）      動(dòng)力      可能結果 
       1            +           有          大腸埃希菌 
       2            —          +             有             傷寒沙門(mén)菌 
       3            —          +             無(wú)             痢疾志賀菌 
    臨床標本的檢測中，根據實(shí)驗結果查閱相關(guān)資料進(jìn)行綜一合判定。 
3、血清學(xué)最終鑒定根據雙糖培養液及系列生化反應結果判斷，最后利用血清學(xué)實(shí)驗對細菌進(jìn)行最后的確定。 
（1）如果初步鑒定結果為沙門(mén)菌屬，則取雙糖培養液斜面上菌苔與沙門(mén)菌多價(jià)“O”（A-F組）診斷血清作玻片凝集實(shí)驗，如凝集即為沙門(mén)菌屬，然后分別與A-F組的單價(jià)“O”診斷血清作玻片凝集實(shí)驗定組，最后以H因子診斷血清作玻片凝集實(shí)驗以定型（種），必要時(shí)可用因子診斷血清定型。 
（2）如果根據雙糖培養液及系列生化反應結果判斷，初步鑒定結果為志賀菌屬，則取菌苔與志賀菌屬多價(jià)診斷血清作玻片凝集實(shí)驗以定組，必要時(shí)可用因子診斷血清定種或型。 
【注意事項】 
1、若為較典型的沙門(mén)菌生化反應，但與A-F組多價(jià)“O”診斷血清又不發(fā)生凝集反應，應考慮可能為有VI抗原的沙門(mén)菌，可將菌制成懸液以100℃加熱30分鐘以除去VI抗原后，再做血清學(xué)鑒定。同理，如為較典型的志賀菌生化反應又不與其多價(jià)診斷血清發(fā)生凝集，則可用同樣方法加熱100℃1小時(shí)以破壞其K抗原，再做玻片凝集反應鑒定之。 
2、由于志賀菌屬常易發(fā)生耐藥性變異，所以，臨床上如分離出志賀菌屬，均應常規做藥物敏感性實(shí)驗指導臨床治療工作。    
   

 

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