溶血性鏈球菌及檢驗

   
                             溶血性鏈球菌及檢驗
一、生物學(xué)特性
1、形態(tài)與染色
　　鏈球菌呈球形或橢圓形，直徑0.6-1.0μm，呈鏈狀排列，長(cháng)短不一，從4-8個(gè)至20-30個(gè)菌細胞組成不等，鏈的長(cháng)短與細菌的種類(lèi)及生長(cháng)環(huán)境有關(guān)。在液體培養基中易呈長(cháng)鏈，固體培養基中常呈短鏈，由于鏈球菌能產(chǎn)生脫鏈酶，所以正常情況下鏈球菌的鏈不能無(wú)限制的延長(cháng)。多數菌株在血清肉湯中培養2-4h易形成透明質(zhì)酸的莢膜，繼續培養后消失。該菌不形成芽胞，無(wú)鞭毛，易被普通的堿性染料著(zhù)色，革蘭氏陽(yáng)性，老齡培養或被中性粒細胞吞噬后，轉為革蘭氏陰性。
2、培養特征
　　需氧或兼性厭氧菌，營(yíng)養要求較高，普通培養基上生長(cháng)不良，需補充血清、血液、腹水，大多數菌株需核黃素、維生素B6、煙酸等生長(cháng)因子。最適生長(cháng)溫度為37℃，在20-42℃能生長(cháng)，最適pH為7.4-7.6。在血清肉湯中易成長(cháng)鏈，管底呈絮狀或顆粒狀沉淀生長(cháng)。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、邊緣整齊、直徑0.5-0.75mm的細小菌落，不同菌株溶血不一。
3、生化反應
　　分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，對乳糖、甘露醇、水楊苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七葉苷的分解能力因不同菌株而異。一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，觸酶陰性。
4、抗原結構
　　鏈球菌的抗原構造較復雜，主要有三種：
（1）核蛋白抗原 或稱(chēng)P抗原，無(wú)特異性，各種鏈球菌均相同。
（2）多糖抗原 或稱(chēng)C抗原，系群特異性抗原，是細胞壁的多糖組分，可用稀鹽酸等提取。
（3）蛋白質(zhì)抗原 或稱(chēng)表面抗原，具有型特異性，位于C抗原外層，其中可分為M、T、R、S四種不同性質(zhì)的抗原成分，與致病性有關(guān)的是M抗原。
5、分類(lèi)
　　根據鏈球菌在血液培養基上生長(cháng)繁殖后是否溶血及其溶血性質(zhì)分為三類(lèi)。
（1）α-溶血性鏈球菌：菌落周?chē)��?-2mm寬的草綠色溶血環(huán)，也稱(chēng)甲型溶血，這類(lèi)鏈球菌多為條件致病菌。
（2）β-溶血性鏈球菌：菌落周?chē)�形成一個(gè)2-4mm寬、界限分明、完全透明的無(wú)色溶血環(huán)，也稱(chēng)乙型溶血，因而這類(lèi)菌亦稱(chēng)為溶血性鏈球菌，該菌的致病力強，常引起人類(lèi)和動(dòng)物的多種疾病。
（3）γ-鏈球菌：不產(chǎn)生溶血素，菌落周?chē)鸁o(wú)溶血環(huán)，也稱(chēng)為丙型或不溶血性鏈球菌，該菌無(wú)致病性，常存在于乳類(lèi)和糞便中，偶爾也引起感染。
6、抵抗力
　　該菌抵抗力一般不強，60℃30min即被殺死，對常用消毒劑敏感，在干燥塵埃中生存數月。乙型鏈球菌對青霉素、紅霉素、氯霉素、四環(huán)素、磺胺均敏感。青霉素是鏈球菌感染的首選藥物，很少有耐藥性。
二、流行病學(xué)
　　溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣，存在于水、空氣、塵埃、糞便及健康人和動(dòng)物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通過(guò)直接接觸、空氣飛沫傳播或通過(guò)皮膚、粘膜傷口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會(huì )對人類(lèi)進(jìn)行感染。上呼吸道感染患者、人畜化膿性感染部位常成為食品污染的污染源。一般來(lái)說(shuō)，溶血性鏈球菌常通過(guò)以下途徑污染食品：
　　1、食品加工或銷(xiāo)售人員口腔、鼻腔、手、面部有化膿性炎癥時(shí)造成食品的污染；
　　2、食品在加工前就已帶菌、奶�；蓟�膿性乳腺炎或畜禽局部化膿時(shí)，其奶和肉尸某些部位污染；
　　3、熟食制品因包裝不善而使食品受到污染。
三、致病性
　　溶血性鏈球菌�？梢�起皮膚、皮下組織的化膿性炎癥、呼吸道感染、流行性咽炎的爆發(fā)性流行以及新生兒敗血癥、細菌性心內膜炎、猩紅熱和風(fēng)濕熱、腎小球腎炎等變態(tài)反應。溶血性鏈球菌的致病性與其產(chǎn)生的毒素及其侵襲性酶有關(guān)，主要有以下幾種：
　　1、鏈球菌溶血素：溶血素有O和S兩種，O為含有-SH的蛋白質(zhì)，具有抗原性，S為小分子多肽，分子量較小，故無(wú)抗原性。
　　2、致熱外毒素：曾稱(chēng)紅疹毒素或猩紅熱毒素，是人類(lèi)猩紅熱的主要毒性物質(zhì)，會(huì )引起局部或全身紅疹、發(fā)熱、疼痛、惡心、嘔吐、周身不適。
　　3、透明質(zhì)酸酶：又稱(chēng)擴散因子，能分解細胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸，故能增加細菌的侵襲力，使病菌易在組織中擴散。
　　4、鏈激酶：又稱(chēng)鏈球菌纖維蛋白溶酶，能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，具有增強細菌在組織中的擴散作用，該酶耐熱，100℃50分鐘仍可保持活性。
　　5、鏈道酶：又稱(chēng)鏈球菌DNA酶，能使膿液稀薄，促進(jìn)病菌擴散。
　　6、殺白細胞素：能使白細胞失去動(dòng)力，變成球形，最后膨脹破裂。
四、檢驗和控制
（一）檢驗
　　1、樣品處理：取25g固體（或25mL液體）檢樣加入225mL滅菌生理鹽水，制成混懸液。
　　2、吸取5mL混懸液接種至50mL葡萄糖肉浸液肉湯，或直接劃線(xiàn)于血平板（如檢樣污染嚴重，可同時(shí)接種5mL至匹克氏肉湯），36℃培養24h，接種血平板，36℃培養24h,挑起乙型溶血圓形突起的細小菌落，在血平板上分純，觀(guān)察在液體和固體中的培養特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態(tài)，并進(jìn)行鏈激酶試驗和桿菌肽敏感試驗。
　　3、鏈激酶試驗：吸取草酸鉀血漿0.2mL，加0.8mL滅菌生理鹽水，混勻，再加入鏈球菌18-24h36℃肉浸液肉湯培養物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL，混勻，置于36℃水浴10min,血漿混合物自行凝固，觀(guān)察凝塊重新完全溶解的時(shí)間，完全溶解為陽(yáng)性，如24h后不溶解即為陰性。同時(shí)用肉浸液肉湯做陰性對照，用已知的鏈激酶陽(yáng)性的菌株做陽(yáng)性對照。
　　4、桿菌肽敏感試驗：取典型菌落的菌液涂布于血平板上，用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上，36℃培養18-24h，如有抑菌圈出現即為陽(yáng)性。用已知的陽(yáng)性菌株做對照。
（二）控制
　　1、防止帶菌人群對各種食物的污染，患局部化膿性感染、上呼吸道感染的人員要暫停與食品接觸的工作。
　　2、防止對奶及其制品的污染，牛奶場(chǎng)要定期對生產(chǎn)中的奶牛進(jìn)行體檢，堅持擠奶前消毒，一旦發(fā)現患化膿性乳腺炎的奶牛要立即隔離，奶制品要用消毒過(guò)的原料，并注意低溫保存。
　　3、在動(dòng)物屠宰過(guò)程中，應嚴格執行檢驗法規，割除病灶并以流水沖洗；在肉制品加工過(guò)程中發(fā)現化膿性病灶應整塊剔除。

 

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