免疫電鏡觀(guān)察病毒形態(tài)

      許多情況下，病毒顆粒與標本中其他顆�；祀s在一起，很難分辨形態(tài)。免疫電鏡技術(shù)是借助抗血清與病毒顆粒特異性結合，包被病毒使之凝聚加以區別�？梢杂^(guān)察病毒含量較少的標本是其優(yōu)點(diǎn)。 
1、原理 
   標本中的病毒與稀釋的血清中抗體結合形成抗原一抗體復合物，電鏡觀(guān)察。 
2、材料 
①20g/l磷鎢酸（PTA）。用雙蒸餾水配制20g/l磷鎢酸溶液，用1mol/lNaOH校正pH值為6.8。
②涂有炭及聚乙烯醇縮 甲醛的銅網(wǎng)。 
③病毒相應抗血清。 
④平皿、濾紙、游絲鑷子、微量毛細管，10g/l瓊脂凝膠塊，蠟皈。 
3、操作方法 
①取0.9ml病毒懸液，加入0.1ml稀釋的病毒相應血清，37℃30min，充分反應。 
②取10g/l瓊脂凝膠塊，下面墊三層普通濾紙，將一滴抗原-抗體復合物懸滴在瓊脂凝膠塊上，將涂膜的銅網(wǎng)扣在懸滴表面使之漂浮。 
③在懸滴未被吸干之前取下銅網(wǎng)，倒轉在蠟板上，立即滴加磷鎢酸染液染色1min，用濾紙毛邊吸干多余染液，電鏡觀(guān)察。 
4、結果 
   顯示病毒形態(tài)、結構。 
5、注意事項 
   注意掌握抗原、抗體比例，比例適當方可形成大小合適的抗原 ; 抗體復合物。 
   
   

 

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