【原理】
布氏血瓊脂含有豐富的營(yíng)養成分,同上述胰蛋白胨大豆培養基一樣,又加有血液。其中亞硫酸鈉作為還原劑,可降低培養基中氧化還原電位,造成厭氧環(huán)境,故用于厭氧菌藥敏試敏試驗比較適宜。
【成分】
胰蛋白胨
15g
葡萄糖
1g
L半胱氨酸
1g
大豆蛋白(木瓜酶消化)
10g
酵母浸膏
2g
亞硫酸鈉(NaHSO3)
0.1g
氯化鈉
5g
瓊脂
15g
維生素K1
10mg
1%氯化血紅素
0.5ml
羊血或馬血
50~100ml
蒸餾水
1000ml
【制法】
(1)用量簡(jiǎn)量取所需蒸餾水,倒入燒杯中;
(2)分別稱(chēng)取上述各固體成分,加入蒸餾水中,攪勻,煮沸溶解;
(3)配制1%氯化血紅素:稱(chēng)取100mg氯化血紅素,溶于1N氧化鈉10ml溶液中,配成1%濃度;
(4)吸取1%氯化血紅素0.5ml,加入上述培養基中,混勻;
(5)在室溫下調整至PH7.4;
(6)分裝后,121℃滅菌15分鐘;
(7)待冷至50℃時(shí),加入羊血或馬血,使其含量為5%~10%;
(8)傾注于平皿內,使培養基厚度控制在5~6mm厚;
(9)置37℃烘干,備用。
【用途】
用作厭氧菌瓊脂擴散法藥敏試驗。
【注意事項】
1.對于營(yíng)養要求較特殊的產(chǎn)黑色素無(wú)芽孢厭氧桿菌及脆弱類(lèi)桿菌等,要用凍融血瓊脂平皿,并補充氯化血紅素的含量,增加原含量的50%。
2.細菌暴露空氣的時(shí)間,盡可能控制在20分鐘以?xún)?/span>,因該菌遇氧容易死亡。
3.生長(cháng)較快的細菌菌量應控制在105~6CFU(Colony Forming Units)/ml;生長(cháng)較慢的細菌菌量為108CFU/ml。
4.培養基要新鮮配制。
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