一、檢驗原理:
該培養基用于糞腸球菌的分離培養。
牛肉浸粉和蛋白胨提供微生物生長(cháng)所需的碳源、氮源、維生素和生長(cháng)因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發(fā)酵的糖類(lèi);溴甲酚紫為pH指示劑,發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的細菌菌落為黃色;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
牛肉浸粉 |
3.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
蛋白胨 |
10.0 |
乳糖 |
20.0 |
溴甲酚紫 |
0.06 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.1(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱(chēng)取本品53.1 g,加熱煮沸完全溶解于1000 mL蒸餾水中,分裝,115℃高壓滅菌20 min,傾入無(wú)菌平皿,備用。
2. 10倍梯度稀釋法制備質(zhì)控菌株菌懸液,吸取適宜梯度的菌懸液接種于待測培養基和參比培養基(HB0177-8胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA))。
3. 放置于恒溫培養箱36℃需氧培養24 h-48 h,觀(guān)察試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質(zhì)控菌株,放置36℃需氧培養24 h-48 h,試驗結果如圖1所示。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黃色菌落,菌落周?chē)凕S |
屎腸球菌 |
ATCC35667 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黃色菌落,菌落周?chē)凕S |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黃色菌落,菌落周?chē)凕S |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黃色菌落,菌落周?chē)凕S |
圖1 質(zhì)控菌株在含糖牛肉湯瓊脂培養基上的生長(cháng)情況
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