選擇性培養基中用于抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的添加劑

  選擇性培養基是微生物學(xué)中用于分離和鑒定特定微生物的重要工具，其核心原理是通過(guò)添加特定抑制劑或調節環(huán)境條件，抑制非目標菌的生長(cháng)，從而促進(jìn)目標菌的富集。革蘭氏陽(yáng)性菌因其厚實(shí)的肽聚糖細胞壁結構，對某些化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同于革蘭氏陰性菌，這一差異被廣泛應用于選擇性培養基的設計。

一、膽鹽類(lèi)添加劑

作用機制：

  膽鹽（如脫氧膽酸鈉、牛膽鹽）通過(guò)破壞細胞膜脂質(zhì)層，增加膜通透性，干擾能量代謝，從而抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)。此外，膽鹽還能選擇性地促進(jìn)部分腸道革蘭氏陰性菌（如沙門(mén)氏菌、志賀氏菌）的生長(cháng)。

應用實(shí)例：

  1.麥康凱瓊脂（MacConkey Agar）：添加牛膽鹽和結晶紫，抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和部分非致病性腸道菌，同時(shí)通過(guò)乳糖發(fā)酵指示劑（中性紅）區分大腸桿菌（桃紅色菌落）與沙門(mén)氏菌（無(wú)色菌落）。

  2.脫氧膽酸硫化氫乳糖瓊脂（DHLA）：含脫氧膽酸鈉和檸檬酸鈉，可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，但對沙門(mén)氏菌和痢疾桿菌無(wú)影響，同時(shí)通過(guò)硫化氫反應（黑色菌落中心）和乳糖發(fā)酵（紅色菌落）實(shí)現鑒別。

二、結晶紫（Crystal Violet）

作用機制：

  結晶紫通過(guò)干擾肽聚糖的交聯(lián)過(guò)程，抑制革蘭氏陽(yáng)性菌細胞壁的合成，同時(shí)因其對革蘭氏陰性菌外膜穿透性較差，表現出選擇性抑制作用。

應用實(shí)例：

  結晶紫瓊脂：常用于分離大腸桿菌等革蘭氏陰性腸道菌，金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽(yáng)性菌因結晶紫的抑制而無(wú)法生長(cháng)。

三、苯乙醇（Phenylethyl Alcohol, PEA）

作用機制：

  苯乙醇通過(guò)破壞細胞膜脂質(zhì)結構并抑制DNA合成，選擇性抑制革蘭氏陰性菌和部分革蘭氏陽(yáng)性菌。其對需復雜營(yíng)養的革蘭氏陽(yáng)性菌（如葡萄球菌、鏈球菌）抑制作用較弱，因此常用于混合菌群中目標菌的分離。

應用實(shí)例：

  苯乙醇瓊脂：用于臨床樣本中葡萄球菌的富集，同時(shí)抑制腸道桿菌等革蘭氏陰性菌。

四、抗生素類(lèi)抑制劑

作用機制：

  1.多粘菌素B：作用于革蘭氏陰性菌外膜，但在特定組合中可增強對陽(yáng)性菌的抑制。

  2.萬(wàn)古霉素：抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的細胞壁合成，常用于巧克力平板中以選擇性培養嗜血桿菌和奈瑟菌。

  3.疊氮化鈉（Sodium Azide）：通過(guò)抑制細胞呼吸酶，尤其對革蘭氏陽(yáng)性菌有效，常用于血瓊脂中抑制非鏈球菌的陽(yáng)性菌。

應用實(shí)例：

  PALCAM瓊脂：添加多粘菌素B、頭孢他啶和吖啶黃，抑制革蘭氏陽(yáng)性菌及非目標陰性菌，專(zhuān)用于單核細胞增生李斯特氏菌的分離。

五、高鹽與pH調控

作用機制：

  高濃度氯化鈉（如7.5-10%）通過(guò)滲透壓破壞非耐鹽菌的細胞膜，抑制革蘭氏陰性菌和部分陽(yáng)性菌，但主要用于富集耐鹽的革蘭氏陽(yáng)性菌（如金黃色葡萄球菌）。此外，堿性pH（如TCBS瓊脂pH 8.6）可抑制大多數革蘭氏陽(yáng)性菌，同時(shí)促進(jìn)霍亂弧菌等目標菌的生長(cháng)。

應用實(shí)例：

  甘露醇氯化鈉瓊脂（MSA）：含7.5% NaCl，抑制非耐鹽菌，同時(shí)通過(guò)甘露醇發(fā)酵（酚紅指示劑變色）鑒別金黃色葡萄球菌。

六、其他抑制劑控制測量環(huán)境溫度

  玫瑰紅（Rose Bengal）：在中國藍平板中作為弱抑制劑，選擇性抑制革蘭氏陽(yáng)性菌，同時(shí)通過(guò)乳糖發(fā)酵差異鑒別腸道致病菌。

  亮綠染料（Brilliant Green）：在改良亮綠瓊脂中抑制陽(yáng)性菌，并通過(guò)顏色變化輔助菌落觀(guān)察。

總結

  選擇性培養基的設計需綜合考慮目標菌的代謝特性和抑制劑的協(xié)同作用。通過(guò)合理選擇添加劑，微生物學(xué)家能夠精準分離目標菌，為病原體鑒定、環(huán)境監測和工業(yè)發(fā)酵提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。

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