一、物理控制法
1、覆蓋薄層培養基：在已凝固的培養基表面覆蓋一薄層培養基，形成微需氧環(huán)境，抑制細菌遷徙。
2、使用陶瓦蓋吸收水分：陶瓦蓋可吸收培養基表面冷凝水，減少細菌隨水分擴散，但需注意周?chē)傊赡芨闪选?/span>
3、預干燥處理：倒置平板于37℃烘箱干燥30分鐘，或超凈臺開(kāi)蓋風(fēng)干15-30分鐘，降低表面水分。
二、培養基調整法
1、添加TTC（氯化三苯基四氮唑）：TTC與細菌代謝產(chǎn)物反應顯色，便于計數，同時(shí)抑制菌落蔓延。
2、調整瓊脂濃度：常規培養基瓊脂含量為1.5-2%，針對易擴散菌（如鏈霉菌），可增至2.5%以增強抑制效果。
三、操作優(yōu)化
1、縮短操作時(shí)間：從樣品稀釋到傾注平板控制在20-30分鐘內，避免菌液干涸導致菌落成團。
2、充分混合菌液：傾注培養基時(shí)搖晃平皿，確保菌液分布均勻，減少菌塊形成。
3、立即倒置培養：平板凝固后立即倒置，防止冷凝水滴落至培養基表面。
四、其他輔助方法
1、使用吸水劑：在培養皿蓋內放置無(wú)菌濾紙片吸收多余水分。
2、嚴格滅菌與干燥：確保濾膜、平皿等實(shí)驗器具滅菌徹底，操作時(shí)避免水分殘留。
3、針對性處理變形桿菌：對含變形桿菌的樣品，優(yōu)先選擇覆蓋培養基法，并設置對照驗證準確性。
綜合建議
1、優(yōu)先組合方法：例如“覆蓋薄層培養基+添加TTC”或“預干燥+調整瓊脂濃度”。
2、環(huán)境控制：保持培養箱濕度適中，減少外部污染風(fēng)險。
3、驗證與調整：不同樣品需預實(shí)驗驗證方法適用性，避免單一方法導致計數偏差。
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