一、蠟樣芽胞桿菌簡(jiǎn)介
蠟樣芽胞桿菌是廣泛存在于自然界中的一種革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌,部分菌株能產(chǎn)生毒素,若食品或水中的蠟樣芽胞桿菌污染嚴重,人食用后可能引發(fā)食物中毒。由于蠟樣芽胞桿菌能產(chǎn)生耐熱性較強的芽孢,因此也常造成食物殺菌失敗,產(chǎn)生腐敗現象。在平板上的菌落表面呈毛玻璃蠟狀,因此起名為蠟樣芽胞桿菌。
二、蠟樣芽胞桿菌的活化培養及保存
蠟樣芽胞桿菌對營(yíng)養要求不高,易于培養,使用含蛋白胨或酵母浸粉的培養基即可生長(cháng)良好,常用TSA/TSB、NA/NB、BHI、LB等培養基活化和培養,也可使用血平板。蠟樣芽胞桿菌菌落酷似蠟狀,菌落不規則且較大,在營(yíng)養瓊脂上培養18-24h即可達到3-5mm,在血瓊脂上可觀(guān)察到溶血現象,多數為β溶血,也有部分菌株為α溶血。
常見(jiàn)的斜面保存法、半固體保存法、甘油凍存法、瓷珠保存法、脫脂牛奶保存法等方法均可用于蠟樣芽胞桿菌的保存。由于蠟樣芽胞桿菌可產(chǎn)芽孢,因此即使使用斜面2-8℃冷藏保存,也可輕松存活3個(gè)月以上。長(cháng)期保存可使用瓷珠保存法、甘油凍存法或脫脂牛奶冷凍保存法,在-20℃或-70℃以下冷凍保存,溫度越低保存期越長(cháng),一年以?xún)瓤稍?20℃保存,一年以上建議在-70℃以下保存。
三、蠟樣芽胞桿菌的鑒定
蠟樣芽胞桿菌革蘭氏染色為陽(yáng)性桿菌,在MYP平板上菌落周?chē)袝灜h(huán)(卵黃反應+),過(guò)氧化氫酶+,酪蛋白分解+,溶菌酶耐性+,厭氧分解葡萄糖+,甘露醇產(chǎn)酸-,溶血+,根狀生長(cháng)-,蛋白質(zhì)毒素晶體-,大多數菌株有動(dòng)力,也有部分菌株無(wú)動(dòng)力或動(dòng)力不強。VP和硝酸鹽還原反應通常為陽(yáng)性,也有部分菌株反應為陰性。根據蠟樣芽胞桿菌的VP反應、硝酸鹽還原、西蒙氏檸檬酸鹽利用、明膠液化及淀粉水解反應的不同,可分為15種生化群(詳情可參考GB4789.14標準)。
與蘇云金芽孢桿菌的區分:蠟樣芽胞桿菌與蘇云金芽孢桿菌的生化反應幾乎完全一致,平板上的菌落特征也幾乎相同,通常生化反應難以區分,在GB4789.14標準是通過(guò)有無(wú)產(chǎn)生蛋白質(zhì)毒素結晶進(jìn)行區分。在分子生物學(xué)上,二者的親緣關(guān)系很近,也有人認為蘇云金芽孢桿菌屬于蠟樣芽胞桿菌的一種。
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