一、產(chǎn)品介紹
沙門(mén)氏菌生化鑒定條和成套生化鑒定管是根據GB4789.4-2016標準制作,用于沙門(mén)氏菌的生化鑒定。
沙門(mén)氏菌成套生化鑒定管是由獨立的安瓿瓶組裝而成,包括賴(lài)氨酸脫羧酶試驗、靛基質(zhì)試驗、氰化鉀試驗、尿素酶試驗、甘露醇發(fā)酵、山梨醇發(fā)酵、水楊苷發(fā)酵、丙二酸鹽、ONPG和衛矛醇共十種生化反應。沙門(mén)氏菌鑒定條則是一體化形式,生化反應內容與成套生化鑒定管相同。
注:需配套Kovacs靛基質(zhì)試劑盒一起使用。生化鑒定條另需準備無(wú)菌液體石蠟。
二、產(chǎn)品的使用方法
1.使用前準備
使用前先檢查鑒定管或鑒定條的顏色是否正確,有無(wú)污染出現。成套生化鑒定管可先做賴(lài)氨酸脫羧酶試驗、靛基質(zhì)試驗、氰化鉀試驗和尿素酶試驗,根據結果再決定是否需補充其他試驗。本產(chǎn)品不含三糖鐵瓊脂,建議自行準備好三糖鐵瓊脂同時(shí)接種,最終結果判讀需結合三糖鐵瓊脂的反應,必要時(shí)還需做血清學(xué)進(jìn)行確認。
2.接種
挑取待測菌落至無(wú)菌生理鹽水中制成約108-109CFU/mL的菌懸液,向生化管或鑒定條中每孔加入50-100μL的菌液(衛矛醇需用接種針挑取菌落穿刺接種),賴(lài)氨酸及氨基酸脫羧酶對照管需覆蓋液體石蠟約3-5mm厚,將接種后的生化鑒定管置36±1℃培養18-24h。
3.結果記錄
賴(lài)氨酸脫羧酶試驗:若賴(lài)氨酸脫羧酶生化管為紫色,對照管為黃色,記賴(lài)氨酸陽(yáng)性反應,若均為黃色,則記賴(lài)氨酸陰性反應;
靛基質(zhì)試驗(蛋白胨水):培養結束后需滴加Kovacs靛基質(zhì)試劑,若出現玫紅色環(huán)則記靛基質(zhì)陽(yáng)性反應,若為黃色則記靛基質(zhì)陰性反應;
尿素酶試驗:若培養基變?yōu)樯罴t色或玫紅色,則記為尿素酶陽(yáng)性反應,若培養基變黃或顏色不變,則記為尿素酶陰性反應;
氰化鉀試驗:若試驗管與對照管均渾濁,則記為陽(yáng)性反應,若試驗管澄清而對照管渾濁,則記為陰性反應;
甘露醇/山梨醇/水楊苷/衛矛醇:若變?yōu)辄S色則記陰性反應,若不變色或藍綠色、藍色則記為陰性反應;
丙二酸鹽:若變?yōu)樗{色則記陽(yáng)性反應,若不變色或黃色記陰性反應;
ONPG:若變?yōu)辄S色則記陽(yáng)性反應,若仍為無(wú)色則記陰性反應。
三、結果判讀
按照GB4789.4-2016標準進(jìn)行判斷,可按以下分步進(jìn)行(沙門(mén)氏菌生化分型較多,進(jìn)行結果判讀時(shí)并非所有生化都能用得上,例如第一步出現反應4或5,可直接排除沙門(mén)氏菌的可能,其他反應不必關(guān)注結果)
(1)三糖鐵和賴(lài)氨酸反應
|
三糖鐵瓊脂 |
賴(lài)氨酸 |
結果判讀 |
反應1 |
K/A(斜面紅,底層黃) |
+ |
可疑沙門(mén),進(jìn)行下一步判讀 |
反應2 |
K/A |
- |
可疑沙門(mén),進(jìn)行下一步判讀 |
反應3 |
A/A(斜面底層均黃) |
+ |
可疑沙門(mén),進(jìn)行下一步判讀 |
反應4 |
A/A |
- |
非沙門(mén)氏菌 |
反應5 |
K/K(斜面底層均紅) |
+/- |
非沙門(mén)氏菌 |
(2)靛基質(zhì)、尿素酶、氰化鉀、賴(lài)氨酸、硫化氫(三糖鐵底層出現黑色即為硫化氫陽(yáng)性)
|
硫化氫 |
靛基質(zhì) |
尿素酶 |
氰化鉀 |
賴(lài)氨酸 |
結果判讀 |
反應1 |
+ |
- |
- |
- |
+ |
典型沙門(mén)氏菌 |
反應2 |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
可疑沙門(mén) |
反應3 |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
可疑沙門(mén) |
反應4 |
- |
- |
- |
- |
- |
可疑沙門(mén) |
反應5 |
- |
- |
- |
- |
+ |
可疑沙門(mén) |
反應6 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
可疑沙門(mén) |
其他 |
與以上6種不同 |
非沙門(mén)氏菌 |
若出現反應1,則為典型沙門(mén)氏菌,結合血清結果報告即可,無(wú)需再看其他反應;
若出現反應2,則可能為靛基質(zhì)陽(yáng)性變體沙門(mén)氏菌,需再看山梨醇和甘露醇的反應結果,若兩者同時(shí)為陽(yáng)性,再做血清學(xué)試驗進(jìn)行確證。若山梨醇和甘露醇反應結果不同時(shí)為陽(yáng)性,或者血清學(xué)試驗不符,則為非沙門(mén)氏菌。
若出現反應3,可能為個(gè)別變種的沙門(mén)氏菌,直接通過(guò)血清學(xué)進(jìn)行確證,若血清學(xué)試驗不符,則為非沙門(mén)氏菌。
若出現反應4,則可能為甲型副傷寒沙門(mén)菌,直接通過(guò)血清學(xué)進(jìn)行確證,若血清學(xué)試驗不符,則為非沙門(mén)氏菌。
若出現反應5,則可能為不產(chǎn)硫化氫的沙門(mén)氏菌,需再看ONPG的試驗結果,若ONPG為陰性,再進(jìn)行血清學(xué)確證。若ONPG為陽(yáng)性或血清學(xué)不符合,則為非沙門(mén)氏菌。
若出現反應6,可能為氰化鉀陽(yáng)性的沙門(mén)菌群,進(jìn)行下一步生化判讀。
(3)氰化鉀陽(yáng)性沙門(mén)氏菌生化反應判讀
|
賴(lài)氨酸 |
靛基質(zhì) |
尿素酶 |
KCN |
山梨醇 |
水楊苷 |
丙二酸鹽 |
ONPG |
衛矛醇 |
沙門(mén)IV群 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
沙門(mén)V群 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
若不符合以上反應,則為非沙門(mén)氏菌。
相關(guān)產(chǎn)品
沙門(mén)氏菌成套生化鑒定管-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
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