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    沙門(mén)氏菌生化鑒定條及成套生化鑒定管的使用

    盧悅
    錄入時(shí)間:2025/5/16 10:28:30 來(lái)源:青島海博生物

    一、產(chǎn)品介紹

      沙門(mén)氏菌生化鑒定條和成套生化鑒定管是根據GB4789.4-2016標準制作,用于沙門(mén)氏菌的生化鑒定。

      沙門(mén)氏菌成套生化鑒定管是由獨立的安瓿瓶組裝而成,包括賴(lài)氨酸脫羧酶試驗、靛基質(zhì)試驗、氰化鉀試驗、尿素酶試驗、甘露醇發(fā)酵、山梨醇發(fā)酵、水楊苷發(fā)酵、丙二酸鹽、ONPG和衛矛醇共十種生化反應。沙門(mén)氏菌鑒定條則是一體化形式,生化反應內容與成套生化鑒定管相同。

      注:需配套Kovacs靛基質(zhì)試劑盒一起使用。生化鑒定條另需準備無(wú)菌液體石蠟。


    二、產(chǎn)品的使用方法

      1.使用前準備

      使用前先檢查鑒定管或鑒定條的顏色是否正確,有無(wú)污染出現。成套生化鑒定管可先做賴(lài)氨酸脫羧酶試驗、靛基質(zhì)試驗、氰化鉀試驗和尿素酶試驗,根據結果再決定是否需補充其他試驗。本產(chǎn)品不含三糖鐵瓊脂,建議自行準備好三糖鐵瓊脂同時(shí)接種,最終結果判讀需結合三糖鐵瓊脂的反應,必要時(shí)還需做血清學(xué)進(jìn)行確認。

      2.接種

      挑取待測菌落至無(wú)菌生理鹽水中制成約108-109CFU/mL的菌懸液,向生化管或鑒定條中每孔加入50-100μL的菌液(衛矛醇需用接種針挑取菌落穿刺接種),賴(lài)氨酸及氨基酸脫羧酶對照管需覆蓋液體石蠟約3-5mm厚,將接種后的生化鑒定管置36±1℃培養18-24h。

      3.結果記錄

      賴(lài)氨酸脫羧酶試驗:若賴(lài)氨酸脫羧酶生化管為紫色,對照管為黃色,記賴(lài)氨酸陽(yáng)性反應,若均為黃色,則記賴(lài)氨酸陰性反應;

      靛基質(zhì)試驗(蛋白胨水):培養結束后需滴加Kovacs靛基質(zhì)試劑,若出現玫紅色環(huán)則記靛基質(zhì)陽(yáng)性反應,若為黃色則記靛基質(zhì)陰性反應;

      尿素酶試驗:若培養基變?yōu)樯罴t色或玫紅色,則記為尿素酶陽(yáng)性反應,若培養基變黃或顏色不變,則記為尿素酶陰性反應;

      氰化鉀試驗:若試驗管與對照管均渾濁,則記為陽(yáng)性反應,若試驗管澄清而對照管渾濁,則記為陰性反應;

      甘露醇/山梨醇/水楊苷/衛矛醇:若變?yōu)辄S色則記陰性反應,若不變色或藍綠色、藍色則記為陰性反應;

      丙二酸鹽:若變?yōu)樗{色則記陽(yáng)性反應,若不變色或黃色記陰性反應;

      ONPG:若變?yōu)辄S色則記陽(yáng)性反應,若仍為無(wú)色則記陰性反應。


    三、結果判讀

      按照GB4789.4-2016標準進(jìn)行判斷,可按以下分步進(jìn)行(沙門(mén)氏菌生化分型較多,進(jìn)行結果判讀時(shí)并非所有生化都能用得上,例如第一步出現反應4或5,可直接排除沙門(mén)氏菌的可能,其他反應不必關(guān)注結果)

      (1)三糖鐵和賴(lài)氨酸反應


    三糖鐵瓊脂

    賴(lài)氨酸

    結果判讀

    反應1

    K/A(斜面紅,底層黃)

    +

    可疑沙門(mén),進(jìn)行下一步判讀

    反應2

    K/A

    -

    可疑沙門(mén),進(jìn)行下一步判讀

    反應3

    A/A(斜面底層均黃)

    +

    可疑沙門(mén),進(jìn)行下一步判讀

    反應4

    A/A

    -

    非沙門(mén)氏菌

    反應5

    K/K(斜面底層均紅)

    +/-

    非沙門(mén)氏菌


      (2)靛基質(zhì)、尿素酶、氰化鉀、賴(lài)氨酸、硫化氫(三糖鐵底層出現黑色即為硫化氫陽(yáng)性)


    硫化氫

    靛基質(zhì)

    尿素酶

    氰化鉀

    賴(lài)氨酸

    結果判讀

    反應1

    +

    -

    -

    -

    +

    典型沙門(mén)氏菌

    反應2

    +

    +

    -

    -

    +

    可疑沙門(mén)

    反應3

    +

    -

    +

    -

    +

    可疑沙門(mén)

    反應4

    -

    -

    -

    -

    -

    可疑沙門(mén)

    反應5

    -

    -

    -

    -

    +

    可疑沙門(mén)

    反應6

    +

    -

    -

    +

    +

    可疑沙門(mén)

    其他

    與以上6種不同

    非沙門(mén)氏菌

      若出現反應1,則為典型沙門(mén)氏菌,結合血清結果報告即可,無(wú)需再看其他反應;

      若出現反應2,則可能為靛基質(zhì)陽(yáng)性變體沙門(mén)氏菌,需再看山梨醇和甘露醇的反應結果,若兩者同時(shí)為陽(yáng)性,再做血清學(xué)試驗進(jìn)行確證。若山梨醇和甘露醇反應結果不同時(shí)為陽(yáng)性,或者血清學(xué)試驗不符,則為非沙門(mén)氏菌。

      若出現反應3,可能為個(gè)別變種的沙門(mén)氏菌,直接通過(guò)血清學(xué)進(jìn)行確證,若血清學(xué)試驗不符,則為非沙門(mén)氏菌。

      若出現反應4,則可能為甲型副傷寒沙門(mén)菌,直接通過(guò)血清學(xué)進(jìn)行確證,若血清學(xué)試驗不符,則為非沙門(mén)氏菌。

      若出現反應5,則可能為不產(chǎn)硫化氫的沙門(mén)氏菌,需再看ONPG的試驗結果,若ONPG為陰性,再進(jìn)行血清學(xué)確證。若ONPG為陽(yáng)性或血清學(xué)不符合,則為非沙門(mén)氏菌。

      若出現反應6,可能為氰化鉀陽(yáng)性的沙門(mén)菌群,進(jìn)行下一步生化判讀。

      (3)氰化鉀陽(yáng)性沙門(mén)氏菌生化反應判讀


    賴(lài)氨酸

    靛基質(zhì)

    尿素酶

    KCN

    山梨醇

    水楊苷

    丙二酸鹽

    ONPG

    衛矛醇

    沙門(mén)IV群

    +

    -

    -

    +

    +

    +

    -

    -

    -

    沙門(mén)V群

    +

    -

    -

    +

    +

    -

    -

    +

    +

      若不符合以上反應,則為非沙門(mén)氏菌。


    相關(guān)產(chǎn)品

    沙門(mén)氏菌成套生化鑒定管-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

    HBI沙門(mén)氏菌生化鑒定條(GB)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

    注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。


     

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