沙門(mén)氏菌的活化、保存和鑒定

一、沙門(mén)氏菌簡(jiǎn)介

  沙門(mén)氏菌（Salmonella）是一種常見(jiàn)的腸道致病菌，特別是受糞便污染的環(huán)境、水、肉制品和蛋制品等食品中易存在，革蘭氏染色為陰性桿菌，兼性厭氧，存在多種生化群，大約2000個(gè)血清型，因此在進(jìn)行鑒定時(shí)要比其他菌復雜一些，目前在GB4789.4-2024標準中列出了常見(jiàn)的7個(gè)生化型，I型和II是最常見(jiàn)的沙門(mén)氏菌生化群，絕大多數菌株可以產(chǎn)硫化氫，賴(lài)氨酸脫羧酶為陽(yáng)性，有動(dòng)力，不發(fā)酵乳糖。而III型亞利桑那亞種和雙相亞利桑那亞種為乳糖遲緩發(fā)酵型（ONPG陽(yáng)性，乳糖陰性）或乳糖發(fā)酵型（ONPG和乳糖反應均為陽(yáng)性），與其他沙門(mén)明顯不同，在三糖鐵瓊脂上表現為A/A，在XLD和HE瓊脂上可形成與大腸菌群相似的黃色菌落，傳統的培養基難以分離辨識。

二、沙門(mén)氏菌的培養

  沙門(mén)氏菌的生長(cháng)特性與大腸菌群類(lèi)似，營(yíng)養要求低，易存活，常用的非選擇培養基基本上都可以使用，如TSA/TSB、NB/NA、BHI、LB、PCA等，30-37℃培養18-24h即可快速培養成功，在平板上菌落通常為無(wú)色透明狀或接近培養基本身的顏色。菌種活化不宜采用選擇性培養基（如TTB、XLD、SC、RVS等）。

三、沙門(mén)氏菌的保存

  由于沙門(mén)氏菌易存活的特點(diǎn)，一般的菌種保存方法均可使用。短期保存可以使用斜面保存法或半固體保存法，在2-8℃可存活1-3個(gè)月甚至更久，使用瓷珠法、甘油法活脫脂牛奶進(jìn)行冷凍保存，在-20℃可存活至少一年以上，在-70℃以下可存活數年甚至數十年以上，一般不容易死亡。稱(chēng)取本品46.2g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15min，備用。

四、菌種的生化鑒定

  由于沙門(mén)氏菌的生化群較多，生化反應并不完全一致，可參考GB4789.4標準或細菌鑒定手冊進(jìn)行判斷，也可使用生化鑒定系統。

  GB4789.24標準生化判斷圖表：

  生化1：典型沙門(mén)氏菌反應，大多數沙門(mén)氏菌都是這個(gè)反應。

  生化2：可能為靛基質(zhì)陽(yáng)性變體的沙門(mén)氏菌，需結合血清學(xué)結果確認。

  生化3：尿素酶出現陽(yáng)性大概率不會(huì )是沙門(mén)，但仍然要通過(guò)血清學(xué)試驗進(jìn)行確證。

  生化4：可能為甲型副傷寒沙門(mén)菌，必須同時(shí)做血清符合才能確認。

  生化5：可能為不產(chǎn)硫化氫的沙門(mén)氏菌，需要結合血清學(xué)結果確認。

  生化6：可能為KCN陽(yáng)性的沙門(mén)氏菌生化群，需補做其他生化。（IV型的其他生化反應為衛矛醇-、ONPG-、丙二酸鹽-、明膠液化+、山梨醇+、酒石酸鹽-、半乳糖醛酸+、粘液酸-、γ-谷氨酰轉肽酶+、β-葡糖醛酸酶-、水楊苷+、乳糖-、O1噬菌體裂解-；V型的其他生化反應為衛矛醇+、ONPG+、丙二酸鹽-、明膠液化-、山梨醇+、酒石酸鹽-、半乳糖醛酸+、γ-谷氨酰轉肽酶+、β-葡糖醛酸苷酶-、粘液酸+、水楊苷-、乳糖-）

  若生化反應結果不在以上表格中，則為非沙門(mén)氏菌。

  也可使用博檢革蘭氏陰性菌鑒定系統 點(diǎn)擊查看

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