酚紅在培養基中的影響和作用

  酚紅在培養基中主要作為pH指示劑，其作用與影響可系統歸納如下：

一、核心作用

1.pH指示功能

  顯色范圍：酚紅在pH 6.8（黃色）至8.4（紅色）間變色，中性（pH 7.2~7.4）時(shí)呈橙紅色。 

  代謝監測：通過(guò)顏色變化直觀(guān)反映微生物代謝產(chǎn)酸或產(chǎn)堿： 

  產(chǎn)酸（如糖發(fā)酵）：pH下降，培養基變黃（如大腸桿菌發(fā)酵乳糖）。 

  產(chǎn)堿（如蛋白質(zhì)脫氨）：pH上升，培養基變紅（如變形桿菌分解尿素產(chǎn)氨）。 

2.輔助菌種鑒定 

  鑒別培養基應用： 

  TSI斜面：通過(guò)葡萄糖/乳糖發(fā)酵差異及H₂S產(chǎn)生，結合酚紅變色區分腸桿菌科細菌（如沙門(mén)氏菌與大腸桿菌）。 

  尿素培養基：產(chǎn)脲酶細菌（如變形桿菌）分解尿素產(chǎn)氨，酚紅變紅。 

二、對微生物的影響

1.低濃度無(wú)毒性 

  常規濃度（0.002-0.005%）通常不影響多數微生物生長(cháng)，確保指示功能與選擇性共存。 

2.潛在抑制效應 

  高濃度敏感菌：部分脆弱菌（如某些厭氧菌）可能受酚紅輕微抑制，需優(yōu)化濃度或選擇替代指示劑（如溴甲酚紫）。 

三、應用注意事項

1.滅菌穩定性

  熱敏感：高壓滅菌（121℃）可能導致酚紅部分降解，建議與含糖成分分開(kāi)滅菌（如葡萄糖115℃滅菌）或過(guò)濾除菌后添加至冷卻培養基。 

2.與其他成分協(xié)同

  糖類(lèi)配伍：常與乳糖、葡萄糖等聯(lián)用，通過(guò)發(fā)酵產(chǎn)酸顯色（如麥康凱瓊脂中乳糖發(fā)酵菌落呈粉色）。 

  抑制干擾：含膽鹽的培養基（如SS瓊脂）需確保酚紅顯色不受抑制劑干擾。 

3.光學(xué)干擾

  光降解：長(cháng)期暴露于強光下可能褪色，培養基應避光保存。 

四、典型應用實(shí)例

1.細胞培養

  監控CO₂培養箱中培養基pH（如細胞代謝產(chǎn)酸時(shí)變黃），提示換液或調整CO₂濃度。 

2.微生物鑒別

  TSI培養基： 

  斜面變黃：僅發(fā)酵葡萄糖（如志賀氏菌）。 

  底部變黃+斜面紅：乳糖/蔗糖未發(fā)酵（如沙門(mén)氏菌）。 

  尿素酶試驗：酚紅變紅為陽(yáng)性（如幽門(mén)螺桿菌）。 

五、局限性及替代方案

1.局限性

  窄pH范圍：僅適用于中性至弱堿性環(huán)境，強酸（pH<6.0）或強堿（pH>8.5）場(chǎng)景需換用其他指示劑（如溴甲酚紫、酚酞）。 

  顏色干擾：紅色背景可能掩蓋菌落細節，需結合其他特征（如溶血環(huán)、形態(tài)）觀(guān)察。 

2.替代指示劑

  1)中性紅：用于麥康凱瓊脂，酸性環(huán)境下菌落顯紅色。 

  2)溴甲酚紫：pH 5.2（黃）至6.8（紫），適合低pH變化監測。 

總結

  酚紅通過(guò)可視化pH變化，在微生物鑒定與細胞培養中發(fā)揮關(guān)鍵指示作用。其低毒性與廣泛適用性使其成為經(jīng)典選擇，但需注意滅菌穩定性、濃度控制及配伍優(yōu)化，以確保檢測準確性與微生物生長(cháng)不受干擾。

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