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    大腸菌群培養基(日本)檢驗原理和使用方法

    張輝
    錄入時(shí)間:2025/5/6 10:15:39 來(lái)源:青島海博生物

    一、檢驗原理:

      大腸菌群(Coliforms)是指在一定培養條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌。一般認為該菌群細菌主要包括腸桿菌科中埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。大腸菌群都是直接或間接地來(lái)自人和溫血動(dòng)物的糞便。所以食品中檢出大腸菌群就表示食品受人、溫血動(dòng)物的糞便污染。

      該培養基用于大腸菌群的固體平板檢測。蛋白胨提供微生物生長(cháng)所需的碳源、氮源、維生素和生長(cháng)因子;乳糖為可發(fā)酵的糖類(lèi);去氧膽酸鈉和檸檬酸鐵銨可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng);磷酸氫二鉀為培養基pH緩沖劑;中性紅為pH指示劑,發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的細菌菌落為紅色,不發(fā)酵乳糖的細菌為無(wú)色;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。大腸菌群在固體培養基中發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,在指示劑中性紅的作用下形成可計數的紅色,帶有或不帶有沉淀環(huán)的菌落。


    二、培養基配方(g/L):

    蛋白胨

    10.0

    乳糖

    10.0

    去氧膽酸鈉

    1.0

    磷酸氫二鉀

    2.0

    檸檬酸鐵銨

    2.0

    中性紅

    0.033

    氯化鈉

    5.0

    瓊脂

    15.0

    pH值7.3±0.1(25℃)


    三、試驗方法:

      1. 稱(chēng)取本品45.0 g,加入1000 mL純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸1分鐘,冷卻至45℃-50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。無(wú)需高壓滅菌。

      2. 10倍梯度稀釋法制備質(zhì)控菌株菌懸液,吸取適宜梯度的菌懸液接種于待測培養基和參比培養基(HB0177-8胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA))。

      3. 放置于恒溫培養箱36℃±1℃需氧培養18 h-24 h,觀(guān)察試驗結果。


    四、試驗結果判斷:

      接種以下質(zhì)控菌株,放置36℃±1℃需氧培養18 h-24 h,試驗結果如圖1所示。

    質(zhì)控菌株

    菌株編號

    接種量

    (CFU)

    回收率

    生長(cháng)情況

    其他特征

    大腸埃希氏菌

    ATCC 25922

    10-100

    ≥70%

    +++

    紅色菌落,可有膽酸沉淀環(huán)

    弗氏檸檬酸桿菌

    ATCC 43864

    10-100

    ≥70%

    +++

    紅色菌落,可有膽酸沉淀環(huán)

    陰溝腸桿菌

    ATCC 23355

    10-100

    ≥70%

    +++

    紅色菌落,可有膽酸沉淀環(huán)

    鼠傷寒沙門(mén)氏菌

    ATCC 14028

    10-100

    ≥70%

    +++

    無(wú)色至淡黃色透明菌落

    金黃色葡萄球菌

    ATCC 25923

    100-1000

    /

    -

    抑制


    圖1 質(zhì)控菌株在大腸菌群培養基(日本)上的生長(cháng)情況


    相關(guān)產(chǎn)品:

    大腸菌群培養基(日本)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情


    注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

     

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