2025版GB4789.3大腸菌群檢驗標準更新解讀

1.LST產(chǎn)氣現象觀(guān)察細節更改

  在使用LST觀(guān)察產(chǎn)氣現象時(shí)，增加了振搖試管觀(guān)察產(chǎn)氣的細節操作，這是因為有時(shí)候細菌產(chǎn)氣不多，會(huì )溶解于液體中，倒管收集不到氣體或產(chǎn)氣不明顯。對試管進(jìn)行振搖操作，可以使溶解的氣體溢出上浮，液體中可以觀(guān)察到有細小的氣泡出現一直上浮到液體表面，此現象也為產(chǎn)氣陽(yáng)性。若LST培養至48h均無(wú)產(chǎn)氣現象，則可直接按照附錄中的MPN表報告檢驗結果。

2.LST培養時(shí)間調整

  LST出現產(chǎn)氣現象，需轉接BGLB進(jìn)行確證試驗，舊標準是培養48h觀(guān)察產(chǎn)氣情況，新標準則改為了在24h進(jìn)行初次觀(guān)察，若產(chǎn)氣則可停止培養判為大腸菌群陽(yáng)性，若不產(chǎn)氣則需繼續培養至48h，在某些情況下縮短了檢驗培養的時(shí)間。

3.附錄C的加入

  在進(jìn)行樣品檢驗時(shí)，某些情況下對樣品的含菌量不了解，擔心選擇3個(gè)稀釋度可能不夠，無(wú)法準確得出想要的結果，因此實(shí)際操作時(shí)可能會(huì )做4-5個(gè)稀釋度甚至更多的稀釋度，新標準中增加了的附錄C，則很好的教大家在稀釋度超過(guò)3個(gè)的情況下，該如何選擇進(jìn)行計算。

4.新增測試片法及乳制品培養溫度更改

  大腸菌群平板法中新增了可以使用測試片進(jìn)行檢驗，同時(shí)增加了對乳制品使用30℃進(jìn)行培養的補充條件，一方面是參考了國內外一些乳制品檢驗標準的培養條件（多數乳制品檢驗標準要求培養溫度是30℃左右），一方面也是參與標準修訂的企業(yè)單位經(jīng)過(guò)大量數據驗證分析表明，乳制品使用30℃培養計數結果要高于36℃培養的計數結果。另外在乳制品的實(shí)際檢驗中，有時(shí)候也會(huì )遇到使用平皿傾注法計數＜測試片法的檢驗結果，這也是由于乳制品中存在不耐熱的或受損的大腸菌群，在經(jīng)過(guò)平皿法46℃左右傾注過(guò)程會(huì )導致部分菌死亡，而測試片法則沒(méi)有這個(gè)受熱過(guò)程，從樣品處理到培養基結束一直處于相對低的溫度狀態(tài)，因此計數結果可能遇到高于平皿計數法的情況。

5.VRBA水浴保溫溫度更改

  VRBA的水浴保溫溫度由46±2℃提高到了48±2℃，也是考慮到不同實(shí)驗室的實(shí)際情況和不同瓊脂的凝固點(diǎn)差異，提高水浴保溫的溫度更好的是可以減少瓊脂凝固現象的出現，但實(shí)際操作時(shí)仍然需要注意，傾注時(shí)候的培養基溫度不宜過(guò)高，否則有可能導致計數結果偏少。

6.典型和非典型菌落驗證更改及結果報告

  在VRBA平板觀(guān)察結果時(shí)，經(jīng)常會(huì )遇到同時(shí)出現菌落特征明顯的典型菌落和菌落偏小或暈環(huán)不明顯的非典型菌落，根據實(shí)際檢驗結果統計，非典型菌落經(jīng)過(guò)鑒定至少95%以上都不是大腸菌群，典型菌落經(jīng)過(guò)鑒定是大腸菌群的概率則要高一些，因此在新標準中增加了對典型和非典型菌落分別計數和分開(kāi)鑒定的操作，報告結果時(shí)增加了數字修約的說(shuō)明，并增加了附錄D，列舉了一些例子教大家如何計算和報告計數結果。

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