熱原、內毒素與控制方法

一、熱原與內毒素

  “熱原”指能引起恒溫動(dòng)物體溫異常升高的致熱物質(zhì)，包括細菌性熱原、內源性高分子熱原、內源性低分子熱原及化學(xué)熱原等，從成分上來(lái)看有細菌內毒素、脂質(zhì)膽酸、CpGDNA、鞭毛蛋白和其他非內毒素熱原（NEPs）。

  細菌性熱原是某些微生物的代謝產(chǎn)物、細菌尸體及內毒素。致熱能力最強的是革蘭氏陰性桿菌的產(chǎn)物，其次是革蘭陽(yáng)性桿菌類(lèi)，革蘭陽(yáng)性球菌則較弱，部分霉菌、酵母菌、甚至病毒也能產(chǎn)生熱原。當革蘭氏陰性桿菌死亡或自溶后，脂多糖（LPS）可以從菌體外壁釋放出來(lái)。LPS通常由三部分組成：類(lèi)脂A、核心多糖、O-抗原，其中以類(lèi)脂A的致熱作用最強。由于這種游離的LPS不是細菌主動(dòng)分泌出的毒素（又稱(chēng)外毒素，如破傷風(fēng)毒素），所以又被稱(chēng)為內毒素。盡管不是每一種熱原都具有脂多糖結構，但是所有已知的脂多糖結構的細菌內毒素都有熱原活性，通俗的理解為細菌內毒素是熱原，但熱原不全是細菌內毒素。

  對于在注射用藥物生產(chǎn)中使用的玻璃器皿而言，構成安全風(fēng)險的主要熱原物質(zhì)是內毒素。由于其普遍存在和效力，內毒素被認為是最重要的熱原。其細菌內毒素通常使用鱟試劑（LAL）方法檢測，包括顯色法、凝膠法和比濁法，其中定性和半定量常用凝膠法檢測，定量檢測常用顯色法。

二、內毒素控制

  內毒素的特點(diǎn)表現為熱穩定性，通常滅菌的條件下，往往不足以破壞內毒素，一般需要在250℃高溫干烤30分鐘以上才能完全失活；可溶于水，生產(chǎn)中可用無(wú)熱原水沖洗以除去熱原；吸附性，可被活性炭吸附；可被強酸、強堿、強氧化劑及超聲波破壞等，如0.1M HCl浸泡4小時(shí)、0.1M NaOH浸泡4小時(shí)或雙氧水浸泡4小時(shí)，可完全破壞。

  目前，對于耐熱物品如玻璃制品、金屬制品容器通常使用干熱法除去內毒素。處理方法通常是在烤箱或隧道烘箱中，對容器進(jìn)行200℃干烤至少1小時(shí)或250℃干烤30分鐘以上。應注意在干烤前，被加熱的玻璃器皿上最好不要有水珠，否則可能會(huì )使玻璃器皿損壞。烘烤結束后，玻璃器皿不要馬上從電熱烘箱中拿出，要等溫度適度降低之后才可以拿出，以免因溫差太大而造成玻璃器皿損壞。此外，器皿上不能含有紙質(zhì)或塑料制品，以免烘烤時(shí)燃燒或熔化。

  對于部分玻璃、塑料和其它高分子材料器皿等不耐熱容器的內毒素控制。常用3%～5％雙氧水、重鉻酸鉀硫酸清潔液（重鉻酸鉀：濃硫酸：水配比成1: 1: 10的溶液或1: 2: 8的溶液）、0.1M HCl或0.1M NaOH浸泡處理4小時(shí)以上。注意佩戴防護用具，防止皮膚直接接觸。

  有研究表明，干熱法是去除熱原最有效的處理方法，比濕熱和酸堿處理更能有效降低內毒素水平，而濕熱處理和酸堿處理這兩種去熱原方法之間沒(méi)有顯著(zhù)差異。

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