溫度是培養基保存環(huán)境重要的監測指標之一,有些培養基可室溫保存,有些則需要冷藏或者冷凍保存,這是由培養基不同組分的穩定性決定的。
1.瓊脂:在干粉狀態(tài)下,瓊脂受溫度影響不大室溫或者冷藏甚至是冷凍,對干粉的瓊脂穩定性無(wú)明顯的不利影響。但瓊脂一旦加水制成培養基,則保存溫度不能低于零度,因為水在零度以下會(huì )結冰形成微小冰晶,破壞瓊脂的原有結構,失去原有的性質(zhì)且不能完全恢復。室溫或更高溫度保存下雖然對瓊脂無(wú)明顯不利影響,但考慮到保水和其他組分的穩定性,因此制備好的瓊脂培養基一般保存溫度不宜過(guò)高,建議不超過(guò)30℃,需要長(cháng)期保存的可以選擇密封冷藏保存。
2.蛋白胨/酵母浸粉/牛肉浸粉/維生素等成分:通常本身可以經(jīng)過(guò)121℃短時(shí)間滅菌,對溫度沒(méi)有那么敏感,室溫以下保存一般可以保證較長(cháng)時(shí)間的穩定性,冷藏或冷凍也無(wú)不利影響。但需注意,配制好的溶液若經(jīng)過(guò)冷凍保存,可能會(huì )出現析出現象,這個(gè)現象是可逆的,解凍后搖勻使用,不影響效果。
3.無(wú)機鹽/小分子有機鹽類(lèi):多數無(wú)機鹽(像氯化鈉、磷酸鹽等)或有機鹽(醋酸鈉、檸檬酸鈉等)對溫度并不敏感,室溫、冷凍或冷藏保存對這些鹽類(lèi)無(wú)不利影響,但需注意,溫度降低會(huì )導致許多鹽類(lèi)的溶解度下降,出現結晶析出,因此特別是含有較多鹽的培養基在低溫保存時(shí),需要考慮結晶析出和溶液均一性的問(wèn)題。
4.抗生素類(lèi):許多抗生素都是不耐熱的,需要冷藏或冷凍保存。即使是一些相對穩定的抗生素,在室溫保存時(shí)也會(huì )大大縮短效期,抑菌效果逐漸下降,因此含有抗生素的培養基在進(jìn)行長(cháng)期保存時(shí),通常需要冷藏或冷凍保存。
5.不穩定的鹽類(lèi)或糖類(lèi)/顯色劑等:如亞硫酸鈉,木糖等物質(zhì),溫度較高時(shí)會(huì )緩慢分解,冷藏保存則會(huì )明顯延長(cháng)保存的效期,因此對于含有不穩定成分的培養基,要么是需要現配現用,要么需要冷藏保存短時(shí)間內使用。
6.膽鹽、染料物質(zhì):相對穩定,低溫或高溫對這些物質(zhì)無(wú)明顯的不利影響,可以在室溫長(cháng)期儲存,但需要注意,有些染料在同時(shí)有光照和高溫的情況下會(huì )發(fā)生顏色改變或褪色,因此對于有顏色的培養基,還是建議冷藏保存。
7.血液:含有新鮮血液的培養基(如血平板)需要冷藏保存,血細胞比較嬌貴,溫度過(guò)高血細胞很容易破裂變黑,溫度低于0度則會(huì )由于結冰導致血細胞出現破裂,因此只能冷藏保存。而一些含裂解血或血清的培養基,則可以進(jìn)行冷藏或冷凍保存。
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