細菌的氨基酸脫羧酶試驗需要覆蓋液體石蠟,同時(shí)需以不含氨基酸的管做為對照管,氨基酸脫羧酶陽(yáng)性的細菌會(huì )先分解試驗管和對照管中的葡萄糖產(chǎn)酸,使培養基pH下降,顏色由紫色轉為黃色,然后繼續分解氨基酸產(chǎn)堿,使培養基的pH上升,顏色由黃色轉為紫色,而對照管因沒(méi)有氨基酸可以分解,因此保持黃色。所以在觀(guān)察結果時(shí),對照管黃色,試驗管紫色,可判斷氨基酸反應為陽(yáng)性,試驗管和對照管均為黃色則為陰性反應。但像銅綠假單胞菌這種氧化型細菌,并不能在厭氧條件下分解葡萄糖產(chǎn)酸,最終對照管和試驗管都會(huì )是紫色,無(wú)法判斷結果,本實(shí)驗使用另一種配方的培養基測試銅綠假單胞菌的精氨酸雙水解酶試驗。
試驗管配方(g/L) |
對照管配方(g/L) |
蛋白胨............1.0 |
蛋白胨............1.0 |
氯化鈉............5.0 |
氯化鈉............5.0 |
磷酸氫二鉀.....0.3 |
磷酸氫二鉀....0.3 |
酚紅...............0.01 |
酚紅..................0.01 |
L-精氨酸..............10.0 |
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pH:6.8±0.2 |
pH:6.8±0.2 |
原理:培養基以酚紅為指示劑,pH在6.8±0.2,酚紅顯橙黃-橙紅色色,接種細菌后無(wú)需覆蓋液體石蠟。若細菌可分解精氨酸產(chǎn)堿,則試驗管的pH上升,培養基會(huì )逐漸變紅,而對照管沒(méi)有精氨酸,顏色通常不會(huì )有明顯改變,通過(guò)試驗管與對照管顏色對比可判斷細菌是否能分解精氨酸產(chǎn)堿。
圖1:左1,左3,左5,左7,左9為試驗管,左2,左4,左6,左8,左10為對照管,接種5株不同的銅綠假單胞菌,試驗管均變?yōu)樯罴t色,為陽(yáng)性反應。
圖2:左1,左3,左5,左7,左9為試驗管,左2,左4,左6,左8,左10為對照管,分別接種大腸埃希氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、阪崎腸桿菌、奇異變形桿菌、普通變形桿菌,其中大腸埃希氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、阪崎腸桿菌試驗管明顯變紅,為陽(yáng)性反應,奇異變形桿菌、普通變形桿菌的試驗管和對照管顏色一致,為陰性反應。
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