半固體培養基

【成分】

【制法】

  將瓊脂于液體培養基中煮溶后,調整至pH7.4,分裝于試管或小燒瓶中,121℃滅菌15分鐘后,備用。

【用途】

  固體瓊脂平板多用于點(diǎn)滴定量或不必精確定量適當稀釋的噬菌體裂解試驗,如檢查噬菌體的有無(wú)或初步略知其數量等,或用于噬菌體RTD(細菌的噬菌體分型時(shí)“常規試驗稀釋度”)的測定,噬菌體分型試驗及噬菌體的其它很多試驗也用此瓊脂平皿;也可用作雙層瓊脂平皿的底層，以提供試驗層的營(yíng)養。

  半固體瓊脂主要用于雙層瓊脂平皿的上層,多用于觀(guān)察噬斑,于上層加入一定體積,經(jīng)不同稀釋的噬菌體及宿主菌培養物,能方便和較準確的測定噬菌體的數目(每毫升所含噬斑形成單位的數量Pfu/ml),有些菌容易在固體瓊脂平皿表面形成融匯的菌苔,也可將菌培養物加入到半固體瓊脂中制成上層代替固體平皿,可形成適合于點(diǎn)滴噬菌體的試驗,觀(guān)察在菌苔上裂解結果。以上兩種培養基制成瓊脂平皿也可用于高效價(jià)噬菌體的制備,即用少量液體培養基收集固體瓊脂平皿表面或雙層瓊脂平皿上層的培養物或幾乎融匯的裂解物，經(jīng)離心去除其殘余,再除菌濾過(guò)即可得到。

【注意事項】

  如需加入氯化鈣,為避免加入后高壓滅菌發(fā)生混濁,氯化鈣溶液應單獨滅菌,在使用前加入，使濃度為400μg/ml即可。

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