革蘭(Gram)氏染色液

【原理】

  革蘭氏染色法的原理尚未完全弄清楚，主要有下列3種學(xué)說(shuō)。

  1.等電點(diǎn)學(xué)說(shuō):革蘭氏陽(yáng)性細菌的等電點(diǎn)(pH2~3)比陰性細菌(pH4~5)為低,一般染色時(shí)溶液的pH約在7附近所以陽(yáng)性菌所帶的陰電荷比陰性菌多,攝取堿性染料則較多，結合力強，故不易脫色。

  2.化學(xué)學(xué)說(shuō):革蘭氏陽(yáng)性菌細胞內含有某些特殊化學(xué)成分,認為主要是核糖核酸鎂鹽與多糖的復合物,它能與染料及碘結合成復合物,故不易被酒精溶解脫色。陰性細菌因無(wú)此種成分,故易被酒精脫色。

  3.通透性學(xué)說(shuō):革蘭氏陽(yáng)性菌細胞膜的通透性比陰性菌小,進(jìn)入陽(yáng)性菌細胞內的染料及碘液與菌體內成分結合生成沉淀,因胞膜通透性小,不易被脫色,故不再被復染。革蘭氏陰性菌胞膜通透性大,對染料及碘與菌體內成分結合生成的沉淀,易被酒精溶解脫出,故可被復染。

【成分】

【制法】

  (1)將結晶紫溶于乙醇中制成飽和液,再取此飽和液20ml與草酸銨溶液混合即成;

  (2)先將化鉀溶于10ml蒸餾水中,再加碘至全部溶解后,加蒸餾水至200ml即成;

  (3)將丙酮加于乙醇中即成丙酮乙醇溶液;

  (4)稀釋石炭酸復紅液。

【用途】

  用于細菌的鑒別染色,由此可將細菌分為革蘭氏陽(yáng)性細菌和革蘭氏陰性細菌兩大類(lèi)

【注意事項】

  1.新配制的染液應先用已知的革蘭氏陽(yáng)性菌(如金黃色葡萄球菌)和陰性菌(如大腸桿菌)作對照試驗,以確定所配染色液的質(zhì)量。

  2.結晶紫與草酸銨混合液,不易保存,如有沉淀出現,應重新配制。

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