β-半乳糖苷酶試驗培養基和試劑

【原理】

  某些細菌具有半乳糖苷酶,亦可水解鄰硝基酚β-D-半乳糖苷(簡(jiǎn)稱(chēng)ONPG),而釋放出黃色的鄰硝基酚。根據在單位時(shí)間內有無(wú)黃色反應,以判定有無(wú)p半乳糖苷酚。

【成分】

  試劑

  (1)0.01molpH7.0磷酸鈉緩沖液50ml

  (2)鄰硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)液20ml

  培養基

  10g/L乳糖肉湯瓊脂1000ml

【制法】

  (1)將6.9g磷酸二氫鈉(NaH2PO4·H2O)溶于45ml蒸餾水中,用30%的氫氧化鈉調整至pH7.0,再加蒸餾水至50ml,置4℃冰箱備用。用前如有結晶可加溫溶解;

  (2)稱(chēng)取ONPG80mg,溶于15ml蒸餾水中,再加0.01molpH7.0磷酸鈉緩沖液5ml。調整至pH7.0即為ONPG 液,貯于暗色的瓶中,置4℃冰箱備用;

  (3)在1000ml肉湯瓊脂中,加10g乳糖,即為10g/L乳糖肉湯瓊脂。

【用途】

  用于鑒別腸桿菌及遲緩發(fā)酵乳糖的腸桿菌。

【注意事項】

  ONPG溶液不穩定,久置若呈現黃色,應廢棄不用。必須是無(wú)色的才可用。

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