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一、試驗用途及原理
改良胰蛋白胨大豆液體培養基（mTSB）用于產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌樣品的制備和增菌。
胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨在培養基中作為營(yíng)養物質(zhì)提供菌體生長(cháng)所需要的氮源、維生素、生長(cháng)因子等；氯化鈉維持體系滲透壓平衡；三號膽鹽為抑制劑，抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)；磷酸氫二鉀為菌體生長(cháng)提供相對穩定的酸堿緩沖體系；葡萄糖提供菌體生長(cháng)所需要的碳源。
二、培養基配方（g/L）
|
胰酪蛋白胨 |
17.0 |
|
大豆蛋白胨 |
3.0 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
|
三號膽鹽 |
1.5 |
|
磷酸氫二鉀 |
4.0 |
|
葡萄糖 |
2.5 |
|
pH值7.4±0.2（25℃） |
|
三、試驗方法
1、稱(chēng)取本品33.0g，加熱溶解于1000mL純化水中，分裝，121℃高壓滅菌15min，備用。
2、制備質(zhì)控菌株，做10倍系列梯度稀釋?zhuān)x擇適宜稀釋度的菌懸液，接種至培養基中，并做空白對照。
3、放置于41.5℃±0.5℃恒溫培養箱中，需氧培養18h-24h。
四、質(zhì)控結果
接種以下質(zhì)控菌株，放置于41.5℃±0.5℃的恒溫培養箱中，需氧培養18h-24h。試驗結果如圖1所示。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
生長(cháng)情況 |
其它特征 |
|
大腸桿菌O157 |
ATCC 35150 |
10-100 |
+++ |
渾濁 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
渾濁 |
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
- |
抑制 |
圖1改良胰蛋白胨大豆液體培養基（mTSB）的質(zhì)控菌株培養結果
五、試驗注意事項
1、使用非一次性試管等容器進(jìn)行試驗時(shí)，應對容器進(jìn)行無(wú)菌處理，以免增加試驗的不確定性或污染。
2、滅菌結束后，應盡快取出，冷卻至室溫使用。
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注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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