一、培養基的介紹
在國內外藥典標準中,通常都是使用硫乙醇酸鹽流體培養基對藥品進(jìn)行需氧厭氧菌的無(wú)菌檢驗(主要是厭氧菌的檢驗)。此培養基配方更傾向于厭氧菌的培養,而且無(wú)需借助厭氧設備即可使用,因此也常用于許多厭氧菌的培養。培養基中少量的瓊脂使培養基具有一定的粘度,降低培養基的流動(dòng)性,阻擋外來(lái)氧氣的滲入,硫乙醇酸鈉和胱氨酸具有較強的還原性,可消耗培養基中溶解的氧氣,刃天青做為氧氣指示劑,可幫助觀(guān)察培養基是否處于無(wú)氧狀態(tài)。
二、成分(g/L)
酪胨(胰酶水解) |
15.0 |
酵母浸出粉 |
5.0 |
無(wú)水葡萄糖 |
5.0 |
硫乙醇酸鈉 |
0.5 |
L-胱氨酸 |
0.5 |
氯化鈉 |
2.5 |
刃天青 |
0.001 |
瓊脂 |
0.75 |
pH |
7.1±0.2 |
三、氧化層的控制
(1)配制:培養基中少量的瓊脂作用為增加粘度、阻擋氧氣滲入,因此在配制時(shí)必須要先加熱煮沸確保瓊脂完全溶解均勻,再分裝容器。若未加熱溶解分裝或滅菌導致瓊脂溶解不均勻,培養基的粘度不夠,后期使用時(shí)很容易導致氧氣滲入內部,整體培養基逐漸變紅色。
(2)分裝滅菌:此培養基建議先分裝再進(jìn)行滅菌,滅菌后不要進(jìn)行搖晃,這樣滅菌結束冷卻后培養基通?梢郧逦吹较聦映实S色,表層呈紅色。若先滅菌再分裝,分裝過(guò)程會(huì )接觸氧氣,導致分裝后的培養基呈現紅色,可以在無(wú)氧環(huán)境分裝避免這個(gè)現象出現。
(3)分裝容器:液面深度不夠、接觸氧氣過(guò)多、液面面積大都易導致氧氣的快速滲入,因此在分裝容器中應保持液體具有一定的深度,盡可能減少液面的表面積(即選用細高型容器),同時(shí)減少容器內的空氣。
(4)充氮氣:在進(jìn)行長(cháng)期儲存時(shí),或者容器內的空氣較多時(shí),可采用充氮氣的方式,保護培養基不被氧化,可以使培養基保存更長(cháng)時(shí)間。
(5)加熱除氧:當培養基內氧化層超過(guò)1/3時(shí),可以采用水浴加熱方式驅氧一次。沸水浴后靜置培養基置冷卻,通常氧化層會(huì )減少,但只可水浴加熱驅氧一次,加熱過(guò)度會(huì )影響培養基的性能。
相關(guān)產(chǎn)品:
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