動(dòng)物血清

【原理】

  動(dòng)物血清是組織培養中用量最大的天然培養基。血清中含有豐富的營(yíng)養物質(zhì),包括大分子的蛋白質(zhì)和核酸等。血清的種類(lèi)很多,其中有小牛血清、胎牛血清、馬血清、人胎盤(pán)血清等。胎牛血清比較理想,但不易得到,目前采用較多的是小牛血清,國內已有小牛血清出售。

【成分】

  血清、生理鹽水。

【制法】

  (1) 將取血瓶和取血玻璃插管用的乳膠管連接再采血。所有器械都要包裝并高壓蒸汽滅菌；

  (2) 小牛(出生1周歲的)側臥在周定臺上，用繩擁牢,剪去頸部毛,用碘酒和酒精消毒；

  (3) 沿氣管中線(xiàn)切開(kāi)皮膚,小心剝離組織，分離出動(dòng)脈,用止血謝夾住近心端。后夾住遠心端，中間相距5~7cm，從血管下方穿過(guò)兩根線(xiàn)；

  (4) 酒精消毒頸動(dòng)脈,于遠心三分之二處用眼科剪橫切一小口(勿將動(dòng)脈剪斷)；

  (5) 把取血插管從切口插入動(dòng)脈(向近心端)，用小繩牢固扎住插管頭；

  (6) 打開(kāi)近心端止血鉗,讓血自然流入血瓶?jì)?/span>,每頭小�？扇⊙�1500~2000ml；

  (7) 取血瓶?jì)A斜放置2~4小時(shí)(室溫)，待血液充分凝固,移入4℃冰箱過(guò)夜,讓血清析出；

  (8) 次日吸取上清,以4000rpm,離心30分鐘,收集血清；

  (9) 血清用蔡氏濾菌器過(guò)濾除菌,分裝,細菌培養檢查無(wú)菌后,置低溫(-20℃)冰箱保存。

【用途】

  促進(jìn)細胞生長(cháng),促進(jìn)細胞貼壁,保護細胞,解除脂肪酸、胰酶及金屬離子等的毒性作用,使細胞不受傷害。

【注意事項】

  1.取血瓶應預放30ml生理鹽水,以便于血凝塊和瓶壁分離。

  2.放血時(shí)不宜太快,以防止溶血。少量溶血的血清仍可用。

  3.不能用碘酒消毒頸動(dòng)脈,以防酒精混入血清內。

  4.無(wú)菌檢查可采用肉湯瓊脂培養基。必要時(shí)要進(jìn)行支原體(PPLO)檢查。

  5.血清使用前需經(jīng)56℃水浴內放置30分鐘滅活,以消除補體活性。

上一篇：血清代用品

下一篇：血漿