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一、產(chǎn)品用途及原理
用途：用于培養豬支原體的基礎培養基。
原理：PPLO肉湯、腦心浸液、酵母浸粉提供氮源，維生素，氨基酸和生長(cháng)因子；豬血清提供甾醇、脂質(zhì)類(lèi)并補充氨基酸；Hank's平衡鹽維持培養基滲透壓和pH值；苯酚紅為染料；抑菌劑抑制雜菌生長(cháng)。
二、培養基配方（g/1300mL）
|
PPLO肉湯 |
8.7 |
|
腦心浸液 |
8.2 |
|
酵母浸粉 |
5.0 |
|
Hank's平衡鹽 |
4.475 |
|
苯酚紅 |
0.0225 |
|
pH值7.7±0.1（25℃） |
|
三、試驗方法
1、稱(chēng)取本品26.4g，加熱溶解于1300mL蒸餾水中，121℃高壓滅菌15min，冷卻至室溫，無(wú)菌操作加入433mL豬血清和1支抑菌劑（含桿菌肽0.25g、青霉素0.25g）并調節pH至7.7±0.1（25℃），混勻，分裝，備用。
2、制備質(zhì)控菌株，接種至培養基中，做10倍系列稀釋?zhuān)♂屩?0-9，并做空白對照。
3、放置于36℃±1℃恒溫培養箱中，微需氧培養7d-21d。
四、質(zhì)控結果
接種以下質(zhì)控菌株，放置于36℃±1℃恒溫培養箱中，微需氧培養7d-21d。豬肺炎支原體培養至12d的試驗結果如圖1所示。
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質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
方法 |
質(zhì)控結果 |
其它特征 |
|
豬肺炎支原體 |
/ |
定量 |
生長(cháng)良好 |
10-9稀釋度管變黃 |
圖1 豬支原體培養基培養豬肺炎支原體12d時(shí)的試驗結果
五、試驗注意事項
1、若使用非一次性試管等容器進(jìn)行試驗，容器使用前應使用蒸餾水沖洗干凈，確保無(wú)洗滌液等殘留物，以免增加試驗的不確定性或污染。
2、滅菌結束后，試管口會(huì )有水珠，在進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，水珠很容易與空氣中的細菌接觸以致污染，因此，試管口應灼燒至干燥，膠塞也需過(guò)火，振蕩操作后，若培養基接觸到膠塞，還需再次進(jìn)行灼燒操作。
3、調節pH時(shí)，使用的酸堿試劑需是無(wú)菌的。
4、支原體培養前應使用封口膜封口，可提供微需氧環(huán)境以及降低污染的風(fēng)險。
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注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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