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一、培養基用途：
用于蠟樣芽孢桿菌選擇性増菌培養。
二、培養基成分：
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成分 |
含量（g/L） |
|
胰酪胨 |
17.0 |
|
植物胨 |
3.0 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
|
磷酸氫二鉀 |
2.5 |
|
葡萄糖 |
2.5 |
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pH 7.3±0.1 25℃ |
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三、原理：
胰酪胨、植物胨提供氮源，維生素和生長(cháng)因子；葡萄糖提供碳源；磷酸二氫鉀為緩沖劑；氯化鈉維持滲透壓，添加的抗生素多粘菌素B（2.25萬(wàn)單位）主要可抑制革蘭氏陰性菌的生長(cháng)。
四、操作方法
1、稱(chēng)取本品30.0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝至每瓶225ml，121℃高壓滅菌15min，冷卻至50℃左右時(shí)，添加1支多粘菌素B（2.25萬(wàn)單位），搖晃均勻后，分裝試管。
2、制備工作菌懸液。
3、接種。
目標菌（蠟樣芽孢桿菌CMCC(B) 63303）：接種10CFU-100CFU/管，接種體積不超過(guò)1mL，接種兩個(gè)平型管。同時(shí)將1mL菌懸液（與試管同一稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL涂布平板）接種兩個(gè)平板，做接種量計數用。
非目標菌（大腸埃希氏菌ATCC 25922）：接種1000CFU-5000CFU/管，接種體積不超過(guò)1mL，接種兩個(gè)平型管。同時(shí)將1mL菌懸液（比待測培養基試管接種小10-100倍稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL涂布平板）接種兩個(gè)平板，做接種量計數用。
接種后30±1℃培養24±2小時(shí)。
圖一： 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎30℃培養24小時(shí)后
30±1℃培養24±2小時(shí)后轉接平板。
目標菌（蠟樣芽孢桿菌CMCC(B) 63303）：吸取10ul培養液均勻涂布或螺旋涂布到MYP平板。
非目標菌（大腸埃希氏菌ATCC 25922）：吸取10ul培養液均勻涂布或螺旋涂布到非選擇性平板上（如：TSA）。
4、將轉接后的平板置于30±1℃培養24-48小時(shí)。
圖二：試管轉接平板后試驗現象
五、實(shí)驗結果
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質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
質(zhì)量評定標準 |
特征性反應 |
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蠟樣芽孢桿菌 |
CMCC(B) 63303 |
10-100 |
在MYP上>10CFU |
菌落為微粉紅色，周?chē)械奂t色沉淀環(huán) |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
1000-5000 |
在TSA上<100CFU |
/ |
相關(guān)產(chǎn)品：
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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