一、培養基的用途及原理
一般用于基因工程大腸桿菌的增菌培養或蛋白表達,也可用于多種細菌的增菌培養。
胰蛋白胨、酵母浸粉提供基本營(yíng)養,氯化鈉維持滲透壓。此培養基沒(méi)有選擇性,營(yíng)養適宜,因此也常用來(lái)活化和培養多種常見(jiàn)細菌,如葡萄球菌、芽孢桿菌、腸道菌等,均可生長(cháng)良好。但由于培養基中的氯化鈉濃度為1%,高于營(yíng)養肉湯(0.5%)等一般培養基,某些細菌的生長(cháng)速度會(huì )稍慢一些。
在基因工程大腸桿菌的培養中,LB肉湯是應用最廣泛的培養基之一,它成分簡(jiǎn)單,對于大腸桿菌的克隆載體擴增和蛋白的表達及后續的分離純化都很方便。在實(shí)際的使用中,常在培養基中加入目標菌攜帶的抗性基因對應的抗生素來(lái)達到篩選目標菌和減少雜菌污染的作用。
二、成分(g/L)
胰蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
氯化鈉 |
10.0 |
pH |
7.0±0.1 |
三、配制方法
稱(chēng)取本品25.0g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。
四、生長(cháng)現象及結果觀(guān)察
接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃下培養18-24小時(shí):
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量/CFU |
生長(cháng)現象 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
渾濁 |
大腸埃希氏菌 |
CMCC44102 |
10-100 |
渾濁 |
大腸埃希氏菌 |
DE3(BL21) |
10-100 |
渾濁 |
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